基于UPLC-Q-TOF胰腺癌患者血清代谢组学与研究.pdfVIP

西北大学学报(自然科学版) 篇 2010年6月，第40卷专辑，J蚰．，20lO，V01．40，S．I． ·研究快报· Jollmal0fNortllw∞t Science 矽 uIlive璐畸(NaturalEdidon) ，JNwu 张惠萍，王彦，谷雪，周君裔，阎 超 (上海交通大学药学院，上海200240) MS技术得到两 摘要：目的探讨胰腺癌与正常人之间的代谢模式差异。方法借助UPLCQ—ToF 种人群的血清代谢指纹图谱，采用oPLs·DA开展模式识别分析。结果不同人群在OPLS—DA得 分图上明显分离。结论研究方法可以初步识别两种人群代谢模式，为发掘特异标记物提供依据。 关键词：uPLC MS；代谢组学；胰腺癌；血清 Q-ToF 中图分类号：0657．63文献标识码：A 文章编号：1000．274X(2010)03枷85旬2 胰腺癌(P舳cre鲥c cancer)是一种常见的恶性 肿瘤，其发病率占人类全身肿瘤的1％一3％、消化 1．2样品的收集及预处理 道肿瘤的8％一10％。在我国该病的发病率有不断 采集相同条件下收集的40例健康人，20例胰 上升的趋势，占恶性肿瘤死因的第7—8位…，目前 腺癌病人的血清样品，储存于超低温冰箱(一80℃) 胰腺癌患者总的生存率不足5％。胰腺癌具有高的 中，备用。血清样本中加入乙腈／甲醇混合溶液沉淀 致死率与其高侵袭性的生物学特性及其对全身和局 蛋白，涡旋，离心，取上清液5此进样分析。 部治疗的低敏感性有关，确诊时多已是进展期旧1。 1．3液相色谱一质谱条件 为此建立有效的诊断方法，对于提高胰腺癌患者的 液相色谱条件：流动相A为高纯水(O．1％甲 存活率具有重要意义。 酸)，流动相B为乙腈(0．1％甲酸)，流速为0．4 目前，组学被广泛应用于疾病的研究，如癌症、 I彬min。梯度洗脱程序：O一3nlin，l％一20％B；3 代谢类疾病等，并获得了巨大进展。代谢组学处于 —5min，20％一60％B；5一12lIlin，60％一100％ 系统生物学的最下游，以生物体液(血浆、尿液等) B；12一14．5min，100％B；14．1一17min，1％B； 或组织中的小分子内源性代谢物的动态变化为研究 柱温40℃。 对象，可以全面了解代谢物质在疾病发生、发展中的 kv、 质谱条件：ESI正离子条件：毛细管电压3 变化规律，对疾病的早期诊断和发病机制研究具有 锥孔电压35V、离子源温度loo℃、电喷雾气温度 重要意义。本文将uPLCQ-ToFMS技术应用于胰 L／h、 350℃、电喷雾气流量600L／h、锥孔气流量50 000 腺癌患者的血清代谢物的研究，结合多维统计分析， 质荷比范围50一l In／z。 分别探讨胰腺癌和正常人之间的代谢模式差 异‘3—41。 2结果与讨论 1 实验部分 为了保证分析方法的可靠性，考察了uPLCQ· TOF Ms方法的日内稳定性以及血清样品预处理方 1．1仪器与试剂