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哺乳动物极体功能的重新认识 张德福(上海市农业科学院畜牧兽医研究所 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106) 摘要 哺乳动物卵原细胞在减数分裂过程中先后排出第1极体(PbI)、第2极体 (PbⅡ)。近年来的研究表明，这些极体的染色体和卵原细胞内的染色体一样具有遗传和 生殖潜力。因此，从理论上讲1个卵母细胞能产生4个后代，从而大大提高家畜繁殖效率。 I) 关键词 卵原细胞 减数分裂 第1极体(Pb 第2极体(PbⅡ) 哺乳动物在胚胎时期，由卵黄囊内胚层转移至生 展，为进一步阐明极体的功能提供了有效的实验手段。 殖腺的原始生殖细胞，在性别分化后，形成卵原细胞， 1第l极体(PbI)发育潜力的研究 经过多次分裂增殖，至出生前逐渐停止，最后形成大量 的初级卵母细胞。至出生时为双线期，此时为第1次减 技术对第1极体(PbI)发育潜力作了深入的研究，其 数分裂的休止期，卵母细胞有一明显的核即生发泡。动 操作方法是选择含有活PbI的卵母细胞，对其透明带 物性成熟后，每一发情周期都有一些卵母细胞启动继 穿一小孔，注射管通过小孔插入卵周隙，吸取PbI的 续进行减数分裂过程，生发泡破裂和排出第l极体(Pb 全部内容物，并立即注入去核的卵母细胞，培养2h后 I)，完成第r次减数分裂，并继续进行减数分裂。排卵 将单个精子注入其中。此重组卵内的染色体逐渐凝聚， 时休止于第2次减数分裂(MⅡ)，此时的卵母细胞只 至第2 有与精子相遇受精或人工激活才能启动继续减数分 注入Pb 裂，排出第2极体(PbⅡ)，完成第2次减数分裂。此后 受精卵或人工激活卵可在体内或体外进行卵裂，发育 成胚胎。 在正常情况下，在第1、第2次减数分裂过程中排 只雌鼠怀孕并产仔[3“]。 2第2极体(PbⅡ)发育潜力的研究 出的第1极体(PbI)、第2极体(PbⅡ)不参与胚胎发 育而退化，因此以往一般都认为它们是完全退化，没有 任何功能的小细胞，以至迄今仍有教科书和专著中论 及极体无功能的情况[1’2]。 经电融合构成重组胚。另一方法是将PbⅡ与仅含雄原 近年来，由于哺乳动物核移植等技术的突破，使应 用于研究哺乳动物卵子和胚胎的实验方法有了重大发 继而进行电融合构成重组胚。PbⅡ的重组胚均有发育 育的外部特征来看，二者并无差别，说明这种诱导处理 作用等原因，从而导致表现出不同的效应。所以，在雌 技术没有影响对虾的正常发育。 性化虾中表现出了不同个体间多种酶带的变化，甚至 2)从雌性化虾和正常虾几种同功酶的比较看，1) 在某些组织中缺少某一基本酶带的情况。 虽然正常虾也有新的酶带出现，但出现率较低，只有 另外，雌性化虾幼体比正常虾幼体同一发育阶段， 10％(出现在EST和MDH)。而雌性化虾新酶带的出 现率高达46．6％。雌性化虾酶带增多说明对虾体内这 类酶的编码基因有多个位点，在一般情况下，只能表达 一部分，而在某些因素的诱导下，可以引发出原来尚未 象。雌性化虾的酶带着色均较深，说明其酶活性较强。 表达的位点而表达出来，从而导致新酶带增多。2)为什 证明其后期发育速度较快的原因。 么雌性化虾在某些组织中缺少某一基本的酶带呢?而 总之，从多年的实践和组织学及组织化学等方面 在不同个体之间新酶带的表达又有差异呢?这可能是 验证，这一诱导处理技术基本是成功的，方法是简便可 由于雌性化诱导技术在生物化学反映方面是一种方向 行。至于进一步提高诱导率、探索诱导对虾性转化的机 性不很强的因素，使个体间在处理过程中感应的程度 理等方面的工作，近几年还在摸索中。 不一致，和由于诱导条件使某些酶产生一些化学修饰 2002年第37卷第4期万方数据