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IHC Rabbit DAB
兔抗体免疫组化试剂盒说明书
DAB, RABBIT
DAB, RABBIT
(DDAABB,,RRAABBBBIITT)
cat#/产品编号 (ENS004)
size/规格:60 张片/120 张片
Store at/保存温度: 4℃
一、产品介绍
适用于免疫组化方法的石蜡包埋、冰冻切片、培养细胞涂片及血液标本。
二、试剂盒组成
1、试剂A: 封闭液,为10%山羊血清。1瓶,即用型;3mL(60 张片)
或6mL (120 张片)。
2、试剂B:抗兔生物素化二抗。1瓶,即用型;3mL(60 张片)或6mL (120
张片)。
3、试剂C: 链亲和素标记HRP。1瓶,即用型;3mL(60 张片)或6mL (120
张片)。
4、试剂D: 20倍浓缩DAB底物缓冲液。一支,160μL(60 张片)或320
μL (120 张片)。
5、试剂E: 20倍浓缩DAB显色液。一支,160μL(60 张片)或320μL
(120 张片)。
6、试剂F: 20倍浓缩底物溶液。一支,160μL(60 张片)或320μL (120
张片)。
7、7mL黑色滴瓶 (空),用于稀释浓缩DAB用。使用完毕一定要洗干
净。
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IHC Rabbit DAB
三、保存温度:2℃~8℃保存。
四、所需试剂及材料(本试剂盒未提供,,需要用户自己准备):,,
1、二甲苯、乙醇、无水甲醇
2、蒸馏水或去离子水
3、30% HO
2 2
4、10 mM PBS, pH 7.4或50mM TBS, pH 7.8
5、一抗(兔抗体)
6、苏木精染液
7、封片胶
8、显微镜
五、推荐染色步骤:(以石蜡切片为例)
1、标本制备
石蜡切片用二甲苯常规脱蜡、入水、抗原修复(可根据一抗说明书推
荐方法进行操作)。染色前用PBS浸泡组织或细胞涂片10分钟。(注意:
从此步骤起,严禁标本或组织切片干燥)
2、染色
1)石蜡切片放入3%HO-甲醇液中浸泡10分钟,以消除内源性过
2 2
氧化氢酶的作用。
2)用PBS洗2 分钟/次×3次。
3)加一滴试剂A于组织切片上(需完全覆盖待检组织)孵育10分
钟。
4)倒掉或吸干液体(不要冲洗)。
5)每张切片加二滴(100μL)或适量一抗(需完全覆盖待检组织),
2
IHC Rabbit DAB
湿盒内孵育30~60分钟。
6)用PBS洗2分钟/次×3次。
7)每张切片加一滴试剂B(需完全覆盖待检组织),孵育10分钟。 8)
用PBS洗2分钟/次×3次。
9)每张切片加一滴试剂C(需完全覆盖待检组织),孵育10分钟。
10)用PBS洗2分钟/次×3次。
11)制备DAB显色液(需现用现配;以染一张切片为例;可根据需
要一次染多张切片,具体用量见下表)
① 取2.5μL试剂D加入到50μL蒸馏水中,混匀。
② 取2.5μL试剂E、2.5μL试剂F加入①中,混匀。
配制DAB显色液所需试剂D、E、F用量表
切片数(张) 试剂D 试剂E 试剂F
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