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* * 沉默NET-1基因 对肝癌细胞生物学行为的影响 陈莉，王桂兰，秦婧，吴园园，朱建伟 南通大学附属肿瘤医院病理科 南通大学医学院病理学教研室 肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma HCC）是全球性的健康问题之一。我们南通启东是WHO确定的HCC高发研究现场。 研究基于我们的首次发现NET-1在HCC组织中特定表达，并发现该基因参与HCC细胞的分裂增殖和癌发生、发展密切相关的细胞运动过程,探讨针对NET-1的siRNA抑制肝癌癌细胞株(SMMC-7721)中NET-1基因的表达，及该基因对癌细胞增殖、迁移、内吞的影响。 一、项目研究背景 NET-1与NET-2到NET-7一起统称为NET-X，它们是由Serru等于2000年在EST 数据库中发现的7 个新的含4 次跨膜蛋白超家族( transmembrane 4 superfamily 或tetraspan family, 简称TM4SF) 的成员。 NET-1(C4.8、P503s、Tspan-1) 定位于染色体1p34.1上，其mRNA全长为1297bp(基因库登记号码AF065388)，为TM4SF的成员之一，最近证实其为肿瘤相关基因。 1、NET-1siRNA表达质粒和myc-NET-1重组表达质粒的构建 。 2、细胞培养与转染。 3、细胞内总RNA抽提及RT-