马尾松花粉硫酸酯化多糖调控脾细胞%5bCa2%2b%5di的研究.pdfVIP

美国)；Fura一2／AM、F127(Dojin，日本)；维拉帕米(verapamil)注射液(北京双鹤药 业，北京)。低分子肝素钠注射液(批号：5190，A1faWassennann，美国1。 1．2仪器 荧光分光光度计(CaryEclipse，美国)；二氧化碳培养箱(NUAIRE，美国)； 5804R离心机(Eppendorf，德国)。 2方法 2．1常规方法制备小鼠脾细胞 台盼蓝染色测定活细胞比率95％。重悬细胞于RPMI1640完全培养基中(含 10％胎牛血清)，待用。 2．2脾细胞内钙离子浓度的测定 胞悬液调零后，用荧光分光光度计动力学软件扫描正常对照组脾细胞的荧光值 三次。 2．3多糖及酯化物与抑制剂对【ca2+】i的影响 脾细胞处理同2．2，实验组分别加入终浓度为10mg·L。1的LPS和200mg·L。1 的PPM60—A或SPPM60—A。抑制剂组再分别加入TAK．242(终浓度1mg·L。)、 (LMWH，终浓度O．1IU·L。)和维拉帕米(Ver，终浓度10 mg-L。1)后，再加入 SPPM60．A。钙离子荧光强度F340／F380记录同2．2。 2．4统计学处理