针刺对海洛因复吸大鼠脑神经细胞凋亡影响的实验的研究.pdfVIP

[8] 邹湘辉,庄东红,吴云影等.实时荧光定量 PCR 检测小鼠脑组织中 3-羟基丁酸受体基因 PUMA-G 的转录表达.广东医学.2010,31(1):58-60 [9] 黄碧玉，龚顺波. 针灸戒毒的实验研究与进展[J].中国临床康复.2004，8 （18）：3632-3633. 针刺对海洛因复吸大鼠脑神经细胞凋亡影响的实验研究 1 宋小鸽 吕航 侯晓蓉 蔡兴慧 解光川 （安徽中医学院针灸经络研究所，针灸基础与技术安徽省重点实验室 合肥 230038 ） 基于针灸治疗具有促进脑神经疾病康复，保护、濡养中枢神经细胞的作用， 本研究通过建立海洛因复吸大鼠模型，观察海洛因复吸大鼠海马区、额叶区神经 细胞超微结构的变化；观察分析针刺百会、大椎穴对脑神经细胞凋亡的影响；观 察 Bcl-2 ，Bax 的蛋白表达，分析探讨针刺抗海洛因脑细胞凋亡的作用机制。为 临床针灸治疗海洛因等阿片类药物成瘾提供依据，促进针灸戒毒康复的临床应 用。 1 方法 将 Wistar 大鼠随机分为 4 组，每组 10 只雌雄各半。分别为正常组、对照组、 针刺组、药物组。除正常组外，其余三组大鼠连续递增量肌肉注射海洛因 8d， 建立大鼠海洛因成瘾模型，为染毒。染毒后停止肌肉注射海洛因 5d，自然戒断， 为脱毒。按染毒（成瘾）→脱毒的方法，周而复始反复 3 个阶段，建立海洛因复 吸大鼠模型。在实验前、实验结束时称量各组大鼠体重。处死后取大鼠脑组织， 运用免疫组化法检测 Bcl-2 ，Bax ，的含量。电镜观察大鼠脑神经细胞超微结构的 变化。 2 结果 1.实验结束时，同组与实验前比，大鼠体重均明显增加，有显著性差异 （P0.05 ）。实验结束时，各组大鼠体重比较，无显著性差异；对照组、针刺组、 药物组与正常组比较，对照组体重差异相对较大；针刺组大鼠体重趋于正常组。 2.造模后，对照组 Bcl-2 表达明显减少， Bax 表达明显增加，差异显著 （P0.01 ）； 针刺治疗后，针刺组与对照组相比 Bcl-2 表达明显上升，而 Bax 表达明显下降， 361 有显著性差异（P0.05 ）。3. 电镜观察：正常组视野可见核膜清楚，粗面内质网、 核糖体、细胞核结构基本正常，粗面内质网、线粒体较丰富；对照组视野可见细 胞核凋亡，核染色质聚集，粗面内质网扩张，部分线粒体空泡变性，核周隙增宽； 针刺组、药物组与对照组比较，核膜清楚，线粒体较丰富，粗面内质网正常或轻 度扩张，少数线粒体空泡变性。 3 讨论 大量基础实验研究表明,海洛因成瘾对脑组织具有慢性持续性损害,可使大鼠 脑组织出现广泛性损害, 以神经元的变性为主,其中神经元凋亡是海洛因成瘾致脑 神经元死亡的主要形式。 本实验观察到，海洛因复吸大鼠脑海马区和额叶区神经细胞超微结构可见细 胞核固缩，核染色质聚集，粗面内质网扩张，部分线粒体空泡变性，核周隙增宽 等变化，严重影响了细胞原有的功能。 通过实验可观察到，针刺组大鼠脑神经细胞超微结构显示核膜清楚，线粒体、 粗面内质网较丰富，粗面内质网正常或轻度扩张，少数线粒体空泡变性，提示针 刺对于海洛因复吸大鼠脑神经细胞损伤具有一定的保护作用，有利于维护粗面内 质网、线粒体等细胞器功能的发挥，有利于帮助膜结合核糖体合成的蛋白质转运， 有利于合成 ATP ，为细胞各种生理活动提供能量。 针刺百会、大椎穴，通过强壮身体、益气固本、调节五脏和六腑经气，畅达 气机的作用，有利于健脑醒脑，从而对海洛因损伤的脑组织具有一定的保护作用， 提高脑的康复水平。 本实验结果表明，在建立的海洛因复吸大鼠模型前，各组大鼠体重无明显差 异。造模后，对照组、针灸组和药物组的大鼠体重均有所下降，提示长期递增量 给予海洛因，可抑制大鼠体重增长，海洛因成瘾后骤然停药出现自然戒断时，导 致应激反应出现，使机体大量耗能、体重明显下降。对海洛因复吸大鼠实施针刺 治疗后，大鼠体重上升,针刺组大鼠体重趋于正常组。提示针灸百会、大椎穴， 具有促进海洛因复吸大鼠的机体恢复的作用。 Bcl-2 基因家族在细胞凋亡过程中起着重要作用, Bcl- 2 和 Bax 是 Bcl-2 基因 家族中已被发现与细胞凋亡关系密切的两种 Bcl-2 基因家族蛋白表