补肾调经方对输卵管性不孕症患者体外受精-胚胎移植超排卵周期GDF-9的影响.pdfVIP

世界中医药学会联合会妇科专业委员会第四届中医妇科国际学术大会论文集 补肾调经方对输卵管性不孕症患者体外受精．胚胎 移植超排卵周期GDF-9的影响 常秀峰1，杜惠兰1‘，高星1，张敏2，张建平2，朱爱萍2 l河北医科大学中西医结合学院妇科教研室，石家庄050091 2白求恩国际和平医院妇产科生殖中心，石家庄050082 vitro 卵母细胞质量是影响体外受精．胚胎移植(in fertilization—emb匆o 因素之一，有证据表明卵母细胞通过分泌卵母细胞分泌因子(oocyte．secreted 泡细胞的功能，并在卵子生成、排卵以及受精的调节中起到关键作用【卜4】。生长分化因子9(growth differentiation factor， growth TGF)超家族成员，有研究认为卵泡液中高水平的GDF．9与高质量的卵子和胚胎相关【5刊。中药补 肾调经方具有滋补肝肾，填精养血，调补冲任的作用，实验研究证实该方可以通过多环节、多靶点 发挥促进卵泡发育的作用‘7~9】。本研究以GDF．9为切入点，探讨该方对控制性超排卵周期卵泡液中 GDF．9含量及其在颗粒细胞的表达，以及对IVF．ET结局的影响。 l资料与方法 1．1诊断标准及中医辨证分型标准 西医诊断标准符合输卵管性不孕症诊断标准【10】。中医肾虚不孕症辨证标准参考《中华人民共和 (5)性欲淡漠；(6)两尺脉沉迟。以上6条具备3条即可诊断。 1．2纳入及排除标准 follicle 纳入标准：符合诊断标准；配偶精液检查正常；年龄35岁；基础促卵泡生成素(basal stimulating 者均签署知情同意书。 排除标准：IVF．ET禁忌症：子宫不具备妊娠功能或严重躯体疾病不能承受妊娠；患有严重的精 神疾患；泌尿生殖系统感染；性传播疾病；具有吸毒等严重不良嗜好；接触致畸量的射线；毒物并 处于作用期；子宫内膜异位症及子宫内膜病变者。 1．3一般资料 输卵管性不孕症患者。按随机数字表分为中药+西药控制性超排卵组(治疗组)和单纯西药控制性超 1．4治疗方法 所有患者均采用促性腺激素释放激素激动剂(CmRH-a)长方案降调节。于前一月经周期黄体中 272 世界中医药学会联合会妇科专业委员会第四届中医妇科国际学术大会论文集 间B超监测卵泡发育情况并测血清LH、E2、P，根据患者卵泡发育情况及时调整药物的剂量，当两 chorionic 侧卵巢至少有3个卵泡直径18mm时停药，给予绒毛膜促性腺激素(250J．tg，human 声引导下行穿刺取卵术。治疗组在注射醋酸曲普瑞林同时加服补肾调经方(组成：熟地黄209当 水煎服，每天l剂，早晚分服，至卵泡成熟注射HCG日停药。 1．5观察指标及方法 1．5．1 卵泡液及颗粒细胞收集 保存待测。沉淀中加入磷酸缓冲液(PBS)至5ml混匀，另一离心管中加入人淋巴细胞分离液5ml， 间有一层白色细胞层，即为去除红细胞后的颗粒细胞，吸取此颗粒细胞层加PBS离心，然后转入1．5ml 干净，然后投入液氮快速冷冻至少5min，然后转入．80C冰箱长期冻存待测。 1．5．2记录相关临床数据 包括促性腺激素(gonadotropin，Gn)量、Gn天数、获卵数及临床妊娠率。 1．5．3受精、卵裂和胚胎分级 卵母细胞．放射冠．卵丘复合物(OCCC)常规培养4～6h后加入经处理的丈夫精液，受精后16～ 裂及胚胎质量在受精后第3天评估，胚胎质量按形态学分为4级【12】：I级：胚胎卵裂球等大，形态 规则，胞质均匀清晰，无碎片或5％；2级：胚胎卵裂球不等，形态欠规则，碎片10％～5％；3 级：胚胎卵裂球大小不均，形态欠规则，碎片25％--50％；4级：胚胎卵裂球大小严重不均，碎片