核盘菌弱毒株Ep-1PN的特性及和dsRNA的关系.pdfVIP

核盘菌弱毒株Ep一1PN的特性及其与dsRNA的关系’ 姜道宏 李国庆付艳平 易先宏 王道本 (华中农业大学t保系．武‘祝430070) 蕾善形态形成作了剐定和描述，并通过舛Ep一1PN-棒有性繁殖后代分析、件摹试验和■笠体中的 ■苎生长麓幡，■落呈扇形扩晨，曩蚌形成气生■笠繁麓、■轼#州无序的异常尊落形态．Ep-IPN■ 糠的这些异常特征不能件逆簟有性f殖后代．但可传染营养体素和性蕾株．在Ep-IPN■苎体中可检洲 到d曩RNA的存在，在其有性干代Ep一1PNAl83中没有麓洲到dsRNA，但在被侍亲的■抹中可检洲到与 Ep-IPN具相同太小的dsRNA。目北．d·RNA与Ep一1PN-辣的毒力衰退有重著的正相关． 关●调轼生■羁毒槔Ep-1PN sflerotiorum(Lib．)de 核盘菌(Sclerotinia Bary)是一种分布广泛，严重危害多种檀物的重要 土传病原真菌。常年给我国油料和蕞莱作物的生产造成巨大的经济损失．由于菌核病的侵染循环 十分复杂，菌核在土壤中可长期存活，给防治带来了极大的困难。核盘蕾Ep-IPN菌株是茄子病株 上的菌核分离物，对核盘菌正常寄主不能致病或致病力极其徽弱。植物病原真菌中致病力衰退是 一种较普遍的现象，其衰退原因或是细胞棱遗传物质发生变异或是外来弱毒园子的干扰，并有报 道dsRNA与多种病原真菌的致病力衰退的有关．由于真菌病毒或dsRNA携带者(弱毒株)可向 正常菌株传染，这样导致整个病原真葚种群衰退就成为可能。事实证明病原真菌的真菌病毒或 dsRNA在病害的自然衰退和生物防治中有较重要的作用．Ep一1PN菌株的衰退也可能与真菌病毒 或dsRNA有关，因此本文对Ep一1PN菌株的特性及毒力衰退的原因作了初步的探讨，以期为菌核 瘸的防治提供一种可能途径． 1材料与方法 1．1材料 ’ 。 常菌株，系Ep一1PN子囊孢子单孢分离物． ’： 培葬基；马铃薯葡萄糖固体培养基(PDA)或液体培养基(PDB)，供以上菌株的保存(4℃)、 活化和培养(20℃)。 1．2试验方法 1．2．1 Ep一1PN经活化后，用打孔器(@6ram)打取菌 Ep一1PN菌株的生长及其菌落形态观察 落边缘菌丝块置于20ml 对照。 ‘ 1．2．2Ep一1PN菌株致病力的测定采用菌丝块接种法．打孔器(西6mm)打取Ep一1PN茁落边 ·湖北省自然科学基全赍助理日(编号6149) 90 缘的菌丝块置于离体油菜(华瑞3号)叶片上，以菌丝面紧贴叶面，于20℃生长箱内保湿培养48 小时，测量病斑直径，以Ep一1PNAl83为对照。 1．2．3 PDA／ 方式萌发，待子囊盘成熟后，收集子囊孢子，用稀释法单孢分离，所获分膏物于PDA斜面保存并 比较它们与EP-IPN在生长速度和菌落形态上的关系． 1．2．4 后置于含Z0ml 的差异． 1．2．5Ep-IPN的弱毒特性与RNA的关系 d5RNA的提取和纯化．方法参考文献(Hunst等， 分钟)培养8天，离心收集■筮。无菌水冲洗数次，置于-30．c或一70℃下冰冻过夜，加入提取液充 分研磨，于4℃轻徽振荡30～‘o分钟后，10ooor／分钟4C下离心15分钟．取上清液，加无水乙 醇至终浓度为15％，再加无膏子圩雏素橱CF-II。充分搅拌5分钟．7000r／分钟离心．