ERK在慢性哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用.pdfVIP

维普资讯 查 !! ophysiology 2008，24(3)：417—422 · 4l7 · [文章编号] 1000—4718(2008)03—0417—06 · 论 著 · ERK在慢性哮喘大鼠气道平滑 肌细胞增殖 中的作用 白 晶 ， 刘先胜 ， 徐永健 ， 谢 敏 ， 倪 望， 陈士新 (华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科，湖北 武汉430030) [摘 要] 目的：观察细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)在慢性哮喘大鼠气道平滑肌细胞的表达，以探讨 ERK 信号通路在气道平滑肌增殖中的作用。方法：病理图像分析慢性哮喘大鼠气道重塑，免疫组化法检测ERK和Pc． NA在肺内表达，激光共聚焦显微镜分析ERK1／2、磷酸化ERK1／2和PCNA在气道平滑肌的共表达，免疫印迹和原 位杂交检测气道平滑肌中ERK和PCNA蛋白以及 mRNA的表达。结果：慢性哮喘大鼠有气道平滑肌层增厚 ，出现 结构重塑。ERK和PCNA在肺内表达增强，同时在气道平滑肌上有ERK和PCNA蛋 白与mRNA表达增加。结论： ERK可能是介导慢性哮喘气道重建中平滑肌增殖的重要信号通路之一。 [关键词] 哮喘；有丝分裂素激活蛋 白激酶类 ；气道平滑肌细胞 ；增殖细胞核抗原 [中图分类号] R363 [文献标识码] A RoleofERK onproliferation ofairway smooth musclecellsin chronic asthmaticrats BAIJing，LIUXian—sheng，XUYong—jian，XIEMin，NIWang，CHENShi—xin (DepartmentofRespiratoryMedwine，TorsiHo~itdAffiliatedtoror~iiMedwalCollege，HuazhongUniversityofScience andTechnology，Wuhan430030，China．E—mad：bj1312002@yahoo．corn．ca) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetherolesofextracellularsignal—regulatedkinase(ERK)singalingpathwayon regulatingproliferationofairwaysmoothmusclebyobservingtheexpressionofERK inaiwraysmoothmuscle(ASM)in chronicasthmaticrats．METHODS：AiwrayremodelingWas detectedinchronicasthmaticratsbyusingimageanalysissys- tem．TheexpressionsofERKnadproliferatingcellnuclearnatigen(PCNA)inlungtissuefromchronicasthmaticratswere observedbyimmuocytochemistry staining．Th eexpressionsofERK1／2，p-ERK1／2 nad PCNA were detected inaiwr ay smoohtmuscle(ASM)byimmunofluorescencedoublestainingwithconfocalmicroscopy，nadtheexpressionsofproteinor mRNA ofERKna dPCNAinASM werealsodetectedbyimmunoblottingna dhybridizationinsitu，respectively．RESULT