HSP27作为评价皮肤急性刺激性生物标志物的研究.pdfVIP

生国疸理生理杂志 ChineseJouma10fPathophysio1o 2014，30(5)：887．891 · 887 · [文章编号] 1000-4718(2014)05．0887．05 HSP27作为评价皮肤急性刺激性生物标志物的研究 张贤英 ， 张 磊¨， 戴桃李’， 孟 甜 ， 李淑华 ， 张齐好 ， 黄亚东1,2A (。暨南大学生命科学技术学院医药生物研究院，广东省生物医学T程重点实验室 ，广东 广州510632； 广东省生物制品与药物研究所 ，广东 广州 510300；广k,lI市妇女儿童医疗中心，广东 广州 510623) [摘 要] 目的：应用蛋白组学技术筛选用于评价化合物皮肤急性刺激性的特异性生物标志物。方法：选取 2种欧盟列举的具有代表性的皮肤刺激性化合物十二烷基硫酸钠 (SSI)、l0．十一碳烯酸 (UA)和 1种非刺激性化合 物3，3-二硫代二丙酸 (DA)，严格按照体外评价皮肤刺激性替代方法的检测流程，使人体皮肤组织暴露于化合物 15min，然后裂解组织，提取蛋白，进行二维电泳；选择蛋白表达差异点 ，进行质谱鉴定，并用 rea1．timeRT．PCR和 Westernblotting验证差异蛋 白的表达。结果：在鉴定的8个蛋 白点中，SIS和 uA刺激使人体皮肤热休克蛋 白27 (HSP27)的表达显著上调，与Westernblotting结果一致。结论：HSP27有可能成为评价皮肤刺激性体外替代方法 体系的候选生物标志物 ，其表达强度与刺激强度的关系需进一步探讨。 [关键词】 皮肤刺激；热休克蛋白27；生物标志物 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000．47I8．2014．05．021 HSP27asabiomarkerforpredictingskin irritation inhuman skin ZHANG Xian—ying’ ZHANG Lei，DAITao．1i。 ， ， MENGTian，LIShu．hua，ZHANGQi． hao一．HUANG Ya．dong’ (InstituteofBiomedicine，NationalEngineeringResearchCenterofGeneticMedicine．GuangdongProvincialKeyLaborato- ofBioengineeringMedicine，JinanUniversity，Guangzhou510632，China；GuangdongPrvoincialInstituteofBiological ProductsandMateriaMedica，Guangzhou510300，China； Guangzhou Womenand ChildrenMedcialCenter，Guangzhou 510623，China．E—mail：tqhzhang@ “．edu．cn；tydhuang@jnu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Todiscoverthenovelendpointsforskinirritationresponsesbytwo·dimensionalelectrophore- sis(2DE)-basedproteomics．METHODS：2DE—basedproteomicswasusedtoanalyzetheproteinexpressioninhuman skinexposedt()sodiumlaurylsulfate(SSI)，10一undecenoicacid(UA)and3，3-dithiodipropionicacid(DA)following thetestprotocoloftheEuropeanCentreofrtheValidationofAlternativeMethods(ECVAM)．Thealteredproteinexpres- sionwasvalidatedbyreal—timeRT·PCRandWestern blotting．RESULTS：H