p38MAPK—Pim-3通路可能介导预处理对抗心肌细胞缺氧／复氧损伤.pdfVIP

· l912· 理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009 (1Q)； ：二 鱼 [文章编号] 1000-4718(2009)10—1912—05 p38MAPK—Pim一3通路可能介导预处理对 抗心肌细胞缺氧／复氧损伤 刘 丹 ．-， 何 明 ， 易 波。， 阙爱玲。， 徐江晶 ， 张吉翔 (江西省分子医学重点实验室，南昌大学药学院药理教研室，江西南昌330006；江西省肿瘤医院，江西南昌330029) [摘 要] 目的：研究MAPK通路在原癌基因Pim一3抗心肌急性缺氧复氧损伤中的作用。方法：采用原代 培养新生大鼠的心肌细胞，随机分为4组：正常对照组 (contro1)、缺氧复氧组 (A／R)、缺氧预适应组(APC+A／R)、 阻断剂组。在缺氧预处理前分别用终浓度为 10t~mo／／LSB203850(038MAPK阻断剂)、U0126(ERK1／2阻断剂)、 SP600125(SAPK／JNK阻断剂)与细胞孵育30min。实验结束后测定 MAPKs通路中ERK1／2、JNK、p38MAPK磷酸 化蛋白表达水平及Pim一3蛋白的表达水平，同时检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、四唑盐 (MTT)比色试验 测定细胞存活率、TUNEL法检测细胞凋亡。结果：SB203850、U0126、SP600125能分别取消由APC或 A／R所诱导 ERK1／2、JNK、p38MAPK的磷酸化水平的升高 ；由APC所诱导的Pim一3表达的升高在p38MAPK通路被阻断后明 显下调 (P0．01)，并且心肌细胞LDH值升高，细胞存活率则下降，心肌细胞的凋亡指数升高。结论：038MAPK 的激活可上调原癌基因Pim一3的表达，从而可能对心肌细胞起到保护作用。 [关键词] 基因，Pim一3；MAPK通路 ；心肌细胞 ；预处理 [中图分类号] R363 [文献标识码] A p38MAPK—Pim一3signalpathwaymaybeinvolvedincardiomyocyte anoxiapreconditioningagainstanoxia／reoxygenationinjury LIU Dan ，HEMing。 YIBo，QUEAi—ling。，XUJiang—jing，ZHANGJi—xiang ， (JiangxiProvincialKeyLaboratoryofMolecularMedicine，TheSecondAffiliatedHospital，NanchangUniversity， DepartmentofPharmacology，NanchangUniversitySchoolofPharmaceuticalScience，Nanehang330006，China；Jiangxi PrvoincialOncologicHospital，Nanchang330029，China．E—mail：jixiangz@tom．corn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheroleofmitogen—activatedproteinkinases(MAPKs)pathwaysandthe molecularmechanismbywhichtheproto—oncogenePim一3protectscardiomyocyteagainstanoxia／reoxygenation(A／R) injury．METHODS：Theprimarilyculturedneonatalratventricularcardiomyocyteswererandomlydividedinto4groups： controlgroup；A／R group；APC+A／R group；SB203850，U0126orSP600125+APC+A／Rrgoup．Thecellswerepre— incubatedwithU0126(ERK1／2inhibitor)，SP600125(SAPK／JNKinhibitor)，orSB2