可卡因-苯丙胺调节转录肽激活ERK促进海马神经元合成BDNF.pdfVIP

维普资讯 理生理杂志 ChineseJou—rn—alofPathophysiolo~ 2007,23(7)：1289-1292 · 1289 · [文章编号] 1000—4718(2007)07—1289—04 可卡 因一苯丙胺调节转录肽激活 ERK 促进海马神经元合成 BDNF术 吴 彬 胡胜娣 潘 慧 祝世功 (北京大学医学部生理学与病理生理学系，北京 100083) [摘 要] 目的：探讨细胞外信号调节激酶(ERK)通路在可卡因一苯丙胺调节转录肽 (CART)上调大鼠海马 神经元脑源性神经营养因子 (BDNF)表达中的作用。方法：取 18d的sD大鼠胚胎 (El8)，分离海马神经元，体外 原代培养7d，以不同剂量CART处理细胞，用 Westernblotting方法分别检测不同处理时点 P—ERK表达。再 以 ERK通路特异性阻断剂 PD98059(25ixmol／L)预处理细胞，进一步观察 CART对 P—ERK表达及 BDNF合成的影 响。结果：同对照组比较，CART处理组海马神经元P—ERK表达明显增高 (P0．O1)，BDNF合成增加。PD98059 能阻断内源性 ERK磷酸化、也能阻断CART诱导的ERK磷酸化，同时抑制 CRAT引起的BDNF合成。结论：CART 通过激活ERK促进海马神经元BDNF的合成，从而发挥神经营养作用。 [关键词] 可卡因一苯丙胺调节转录肽；细胞外信号调节激酶类 ；脑源性神经营养因子；海马；神经元 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Cocaine—andamphetamine—regulatedtranscriptinducesBDNF synthe- sisthroughERK activation inhippocampalneurons WU Bin，HU Sheng—di，PAN Hui，ZHU Shi—gong (DepartmentofPhyswlogyandPathophysiology，PekingUniversityHealthScienceCentre，Bejiing100083，China． E—mail：sgzhu@bjmu．edu．en) [ABSTRACT] AIM ：Tostudytheroleofextracellularsignalregulatedkinase(ERK)pathwayincocaine—and amphetamine—reuglatedtranscript(CART)inducedbrain—derivedneurotrophicfactor(BDNF)synthesisinprimarycul· turedhippocampalneurons．METHODS：Theprimaryculturesofhippocma palneuronswereestablishedfrom embryonic rats(day18ofgestation)．TheneuronsweretreatedwithCARTatdifferentdoses(1，10and100nmol／L)andatdiffer· enttimepoints．Theexpressionofphosphory!atedERK (P—ERK)andBDNFwerenaalyzedbyWestern blottingwithor withoutPD98059，anERKpathwayinhibitor，treatment．RESULTS：CART increasedexpressionofprolongedphosphoryl— atedERKinatime—anddose—dependentmannerascomparedwiththecontrols(P0．O1)．andalsoincreasedexpres— sionofBDNF，whichwasinhibitedbyPD98059pretreatment．CONCLUSION：BDNFsynthesisinducedbyCARTisme· diatedthroughERK act