苦参碱对人髓母细胞瘤D341细胞凋亡及相关蛋白表达的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(4)：629-634 · 629 · [文章编号] 1000．4718(2014)04．0629．06 苦参碱对人髓母细胞瘤 D341细胞 凋亡及相关蛋 白表达的影响 周开宇 ， 毛天明， 陈 茜， 罗永康 (台州学院医学院附属台州市立医院，复旦大学附属华山医院台州分院神经外科，浙江 台州318000) [摘 要】 目的：探讨苦参碱在体外对人髓母细胞瘤D341细胞凋亡及Bax、Bc1．2、丝氨酸／苏氨酸激酶Akt和 磷酸化Akt(p-Akt)表达的影响。方法：体外培养的D341细胞分为实验组 (加不同浓度的苦参碱)和对照组 (不加 苦参碱)，用 CCK·8法检测苦参碱对 D341细胞增殖的影响，AnnexinV-FITC／PI双染法检测细胞凋亡 ，Westernblot- ting检测苦参碱对D341细胞Bax、Bcl-2、Akt和p-Akt蛋白表达的影响。结果：苦参碱在体外能明显地抑制D341细 胞的生长，作用呈量效与时效关系；随着作用药物浓度的增高和作用时间的延长，其凋亡率逐渐升高，在透射电镜 下观察，细胞可见染色质趋边固缩，胞浆中空泡增多、变大，并且出现凋亡小体；Westernblotting结果表明，随着药物 浓度的增加，药物能使瘤细胞Bax蛋白的表达水平增强，却使 Bcl-2和p-Akt蛋白的表达水平下降。结论：苦参碱 可诱导D341细胞的凋亡而发挥体外抗肿瘤作用 ，其诱导瘤细胞的凋亡与上调Bax蛋白、下调Bc1-2及PI3K／Akt信 号通路中p-Akt蛋白的表达水平有关。 [关键词] 苦参碱；髓母细胞瘤；Bax蛋白；Bcl-2蛋白；丝氨酸／苏氨酸激酶Akt [中图分类号】 R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2014．40．010 Effectsofmatrineonapoptosisandrelatedprotein expression inhuman medulloblastomaD341cells ZHOU Kai-yu，MAO Tian-ming，CHEN Xi，LUO Yong-kang (DepartmentofNeurosurgery，TaizhouMunicipalHospitalAffiliatedtOTaizhouUnwenityMedcialSchool，TaizhouBranch HospitalofHuashanHospitalAffilatedtoFudanUnwe~hy，Taizhou318000，China．E—mail：kerry2OOOyear@163．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatematrine—inducedapoptosisofhumanmedulloblastomaD341ceHsandtheex- pressionofBax，Bcl-2，serine／threoninekinaseAktandphosphorylatedAkt(p-Akt)invitro．METHODS：D341cells weredividedintoexperimentalgroups(addedwithmatrineatdifferentconcentrations)andcontrolgroup(undertheSaHle conditionswithoutmatrine)．TheproliferationofD341cellswasanalyzedbyCCK-8assay．ApoptosisWasdetectedbyAn- nexinV-FITC／PIdoublestainingnadtheexpressionofBax，Bc1-2，Aktandp-AktWas detectedbyWestern blotting．RE- SULTS：MatrinesignificantlyinhibitedtheproliferationofD341cellsandincreas