磷酸化缺陷型RARα1受体对人多发性骨髓瘤细胞体外增殖的影响.pdfVIP

· 816 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(5)：816—822 【文章编号] 1000-4718(2012)05-0816—07 磷酸化缺陷型 RARal受体 对人多发性骨髓瘤细胞体外增殖的影响 郭小娟 ，郑 冬 ， 王安训 ， 李 娟 ， 夏 盈 (中山大学附属第一医院 血液内科 ； 口腔外科，广东 广州510080) [摘 要] 目的：研究磷酸化缺陷型维甲酸受体 RARal(RARaS77A)对人多发性骨髓瘤 (MM)细胞增殖的 影响。方法：(1)RT—PCR检测U266细胞 RARa受体亚型mRNA的表达；(2)RARotS77A过表达慢病毒载体的构 建，慢病毒包装，滴度测定及 MM细胞转染 ；(3)CCK一8检测全反式维 甲酸 (AnLA，0～100p,mol／L)处理或 RARctS77A过表达慢病毒转染后 U266细胞的增殖；(4)Westernblotting检测RARaS77A过表达慢病毒转染或 AT． RA处理后U266细胞增殖相关蛋白Rb和P53的表达。结果：(1)U266为RARctl(+)、RARa2(一)细胞 ；(2)AT． RA明显抑制U266细胞增殖，其作用呈时间和剂量依赖性；RARaS77A过表达慢病毒转染48h后 U266细胞增殖 明显被抑制，抑制率为 15．16％±3．84％；(3)RARos【77A过表达慢病毒转染及ATRA处理均可上调 U266细胞 Rb 蛋白表达及下调其 P53蛋白表达。结论：磷酸化缺陷型维甲酸受体 RARal与ATRA均可通过上调Rb及下调P53 表达抑制RARal(+)、RARe2(一)的U266细胞增殖 ，提示降低维甲酸受体 RARal的磷酸化是ATRA抑制MM细 胞增殖的一个重要作用途径。 [关键词] 多发性骨髓瘤；受体，维甲酸；磷酸化；细胞增殖 [中圈分类号] R453．9 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．05．009 Effectsofphosphorylation—defectiveretinoicacid receptor onproli- ferationofhumanmultiplemyelomacells／nvitro GUOXiao—juan，ZHENGDong，WANGAn—xun，LIJuan，XIAYing (DepartmentofHematology；DepartmentofOralSurgery，TheFirstAffiliatedHospital，SUNYat—senUnive~i@，Guang- zhou510080，Ch／na．E—mail：zcxzd@tom．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofphosphorylation—defectiveretinoicacidreceptorctl(RARot1) ontheproliferationofhumanmultiplemyelomacells．METHODS：ThemRNA expression ofRARa subtypesinU266 cellswlit8detectedbyRT—PCR．Lentiviralplasmidconstruction，viralproduction，titerdeterminationandcelltrnasfection werecarriedoutbythegeneralmethodsofmolecularbiology．Proliferationnaalysiswasperfomr edwithCCK一8assay．The U266cellsweretreatedwithall—transretinoicacid(ATRA，0—100p~mol／L)ortransfectedwithlentivirusRARetS77A． Theexpressionlevelsofp