灵芝提取物对神经元缺氧复氧损伤的保护作用及其机制的离体研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(11)：2229—2234 · 2229 · 【文章编号] 1000—4718(2010l1l一2229—06 灵芝提取物对神经元缺氧复氧损伤的 保护作用及其机制的离体研究 glff~ ，唐宇平 ，金惠铭 ， 高俊鹏 ， 张国平 ， 王 中 ， 森昌夫 ， 蔡定芳弘，蔡业峰 (广东省中医院神经一科，广东 广州510120；复旦大学 附属中山医院中西医结合科， 上海医学院病理生理系，上海200032； 日本和汉生药研究所，日本 东京 197—0827) [摘 要] 目的：研究灵芝提取物 (GLE)对原代大鼠皮层神经元氧糖剥夺 一再复氧(OGD／R)损伤模型的影 响，在细胞水平探讨GLE神经保护作用的机制。方法：新生sD大鼠的皮层神经元原代培养至第7d，用GLE预处 理神经元OGD／R模型。选取OGD／R后的0h、3h、6h、12h、24h、48h和72h作为观察点，观察GLE干预后对各 个时点的细胞形态学、细胞毒作用、细胞线粒体活性、细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达量的影响。结果：GLE(0．1、 1、10ms／L)能明显减少神经元LDH的释放，提高线粒体活性。流式细胞术结果证实了GLE能抑制神经元OGD／R 损伤导致的凋亡，这种作用甚至能持续至OGD／R后的72h。GLE(0．1、1、10mg／L)下调easpase一3、caspase一8蛋 白的表达，GLE(10ms／L)还能下调easpase-9蛋白表达。结论：GLE对OGD／R诱导的神经元损伤有一定的保护 作用，可能是有效防治急性缺血性卒中的神经保护药物。 [关键词] 细胞凋亡；灵芝；神经元；脑缺血 [中图分类号] R338 [文献标识码】 A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．11．029 Ganodermalucidum extractprotectsratcerebralcorticalneuronsfrom hypoxia／reoxygenationinjuryinvitro ZHOUZi—yi，TANGYu—ping，JINHui—ming ，GAOJun—peng ，ZHANG Guo— ping4 WANGZhong4 MasaoMori，CAIDing—fang ，CAIYe—feng ， ， (F‘irstDepartmentofNeurology，GuangdongProvincialHospitalofTraditionalChineseMedicine，Guangzhou510120。Chi— na；DepartmentofIntegrativeMedicine，ZhongshanHospital，DepartmentofPhysioloyg Pathophysioolgy，ShanghaiMedi— calCollege，FudanUniversity，Shanghai200032，China；WakanShoyakuBotanyInsttiute， 197—0827，Japan； E—mail：dingfangcai@163．corn；caiyefeng@126．c0m) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheneuroprotcetiveeffectofGanodermalucidumextract(GLE)inaninvtiro modelofprimaryculturedneuronswithoxygenandglucosedeprivation(OGD)．METHODS：Neuronalinjurywasin· ducedbyoxygenandglucosedeprivation／reoxygenation(OGD／R)．Theueuronalinjuryandviabilityweredeterminedby LDH leakagena dXTYassayat0h，3h，6h，12h，2