硫唑嘌呤对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响.pdfVIP

理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(5)j7 二 · 785 · [文章编号] 1000-4718(2012)05—0785—06 硫唑嘌呤对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、 细胞周期和凋亡的影响 昝 慧 ， 黄花荣 ， 钟英强 ， 吴新环 ， 叶小研 (中山大学孙逸仙纪念医院 消化内科，儿科，广东 广州510120) [摘 要】 目的：研究硫唑嘌呤(AZA)对sD大鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs)增殖、凋亡和细胞周期的影响， 为炎症性肠病的临床治疗提供实验依据。方法：含 10％FBS的低糖 DMEM培养基培养大 鼠MSCs，50ms／L、 100ms／L、200mg／L、300ms／L的AZA分别作用于大鼠MSCs24h、48h和72h，用显微镜下直接计数法检测 MSCs 的增殖情况并绘制生长曲线 ，用流式细胞术检测 MSCs凋亡和细胞周期。结果：MSCs经过3次传代后可纯化。在 小于100ms／L浓度下，AZA对 MSCs的增殖、细胞周期与凋亡无显著影响(P0．05)，而 AZA在大于200ms／L浓 度下作用72h后，MSCs生长受到明显抑制，抑制率大于66％，凋亡率明显升高(P0．05)；在300mg／L浓度下作 用72h时，MSCs的凋亡率则明显降低，而MSCs坏死率明显升高(P0．05)。在大于200ms／L的AZA作用下，随 着作用时间延长，MSCs进入Go／G，期细胞增多，S期细胞减少(P0．05)。结论：一定浓度的AZA对大鼠MSCs的 增殖 、细胞凋亡和细胞周期均有明显的影响。大剂量的AZA会直接造成 MSCs死亡。 [关键词] 骨髓间充质干细胞；细胞凋亡；细胞周期；硫唑嘌呤；大鼠 [中图分类号] R735 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．05．003 Effectsofazathioprineonproliferation，cellcyclesandapoptosisofme- senchymalstem cellsfrom ratbonemarrow invitro ZAN Hui，HUANG Hua—rong ，ZHONG Ying—qiang ，WU Xin—huan ，YE Xiao一 1 yan (DepartmentofGastroenterology，DepartmentofPediatrics，SunYat—senMemorialHo~itd，SunYat—senUniversity， Guangzhou510120，China，E—mail：zhongyingqiang@21cn．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectsofazahtioprine(AZA)onhteproliferation，cellcycleandapopto- sisofmesenchymalstemcells(MSCs)fromthebonemarrowofSprague—Dawleyratsinvitro．METHODS：MSCswere culturedinlow—glucoseDMEM containing10％ FBS，nadtreatedwi山AZA atconcentrationsof50mg／L，100mg／L，200 mg／Land300mg／Lfor24h．48hand72h．TheeffectsofAZA onthegrowthcurvenadproliferationofMSCsweretested bycellcounterundermicroscope．Theapoptosisandcellcyclewasdeterminedbyflowcytometry．RESULTS：PureMSCs weregainedby3timesofpassages．NosingificanteffectofAZA atconcentrationoflessthna 100m