灵芝多糖对戊四氮活化海马神经细胞NF-κB变化的影响.pdfVIP

维普资讯 理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(2)：379—381 · 379 · [文章编号] 1000—4718(2008)02—0379—03 · 短篇论著 · 灵芝多糖对戊 四氮活化海马神经 细胞 NF—KB变化 的影响术 张金波 ，‘ 张春斌 ，‘ 朱金玲 ，‘ 马小茹 ‘， 罗佳滨 ， 康玉明 ， 刘 爽 ，‘ 王淑秋 ^‘ (’佳木斯大学基础医学院，黑龙江 佳木斯 154007；山西医科大学，山西 太原030001) [摘 要] 目的：本文以新生大鼠的海马神经细胞为研究对象，通过体外培养新生大鼠海马神经细胞，观察 神经细胞生长状况，制备细胞癫痫模型，检测灵芝多糖对癫痫大鼠海马神经细胞的NF—KB变化的影响，进一步探 讨癫痫的发病机制及灵芝多糖的作用。方法：将体外培养海马神经细胞随机分为模型组、灵芝多糖处理组 、对照 组，用免疫荧光化学分析方法检测NF—KB表达的变化。结果：体外培养新生大鼠的海马神经细胞成功，在培养的 第7d，制备细胞癫痫模型，通过免疫细胞荧光化学反应证明戊四氮(PTZ)的作用使 NF—KB核表达较灵芝多糖处 理组和对照组明显增多，提示海马神经细胞被活化，灵芝多糖处理组较模型组 NF—KB核表达少。结论：应用无血 清培养基及联合阿糖胞苷培养方法 ，神经细胞生长 良好 ，获得神经细胞的纯度达90％以上，为神经细胞相关的实验 研究提供了良好的模型。灵芝多糖可能通过减少神经细胞 内钙离子 内流，从而间接抑制PTZ诱导的 NF—KB活 化，降低神经细胞的兴奋性 ，达到抗癫痫作用。 [关键词] 戊四氮；NF—KB；海马；神经元；灵芝多糖 [KEYWORDS] Pentylenetetrazol；NF—kappaB；Hippocampus；Neurons；Ganodermalucidumpolysaccharides [中图分类号] R363 [文献标识码] A 癫痫是 1种慢性脑部疾病。具有长期性 、反复发作性 、难 -cB表达途径来研究 。灵芝多糖是灵芝中的主要有效成分 治性的特点 ，以脑部神经元过度同步化放 电所致的突然、反 之一，研究表明，灵芝多糖具有广泛的药理活性 ，具有提高机 复和短暂的中枢神经系统功能失常为特征。近几十年来，癫 体免疫力 、抑制肿瘤、增强机体耐缺氧能力、消除 自由基 、抗 痫发病率有所增加。我国目前约有900万癫痫患者，且每年 衰老等作用 j。本实验研究灵芝多糖对戊四氮活化海马神 增加 30—4o万新确诊患者…。癫痫致脑损伤 (细胞坏死)已 经细胞的影响，通过体外培养大鼠海马神经细胞 ，建立细胞 被许多动物实验和临床观察所证实。癫痫脑损伤既是癫痫 癫痫模型，检测核因子一KB的活化，进一步探讨癫痫的发病 发作的结果，又是癫痫频发和难治的原因。由于抗癫痫药不 机制及灵芝多糖的作用机制。 能迅速充分抑制癫痫发作，或对有些癫痫疗效较差，甚至无 材 料 和 方 法 效 ，许多学者主张脑保护剂与抗癫痫药联合应用治疗癫痫， 但并未引起临床医师的足够重视。目前，对癫痫发病机制的 1 主要材料 研究表明，核因子一-cB起着不可忽视的作用 ，Blondeau等 Neuralbasal培养基 、B27培养基添加剂、青链霉素 (Gib— 研究发现海人藻酸可快速增加 NF—KB与DNA的连接活动 co)，胰蛋白酶、胎牛血清、多聚赖氨酸(Sigma)，阿糖胞苷 (上 度，使其亚单位产生核移位，认为NF—KB活化作为癫痫发病 海华联制药有限公司)、倒置相差显微镜 (Olympus)、荧光显 机制基础信号转导通路的 1个关键步骤。Lerner—Natoli研 微镜 (Olympus)、NF—KB／p65兔抗 鼠抗体、异硫氰酸荧光素 究癫痫持续状态海马的炎症及免疫改变中发现，长期惊厥产 标记羊抗兔抗体、碘化丙啶(PI)及RNaseA(武汉博士德生物 生 NF—KB活化的标志是 NF—KB表达增加及核移位 J。