木通皂苷D通过丝裂原活化蛋白激酶信号通路促进大鼠骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞水.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(8)：1455—1460 · 1455 · [文章编号] 1000—4718(2012)08—1455—06 木通皂苷 D通过丝裂原活化蛋 白激酶信号通路 促进大 鼠骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞水 张云辉 ， 刘成成 ， 祝爱珍 ， 陈小宇 ， 刘革修 ， 何冬梅 ， 谭广销 (暨南大学 附属第一医院校门诊部 ，医学院血液病研究所 ，广东 广州 510632) [摘 要] 目的：探讨木通皂苷 D(ASD)是否促进大鼠骨髓间充质干细胞 (BMSCs)分化为成骨细胞及其机 制。方法：分离培养大 鼠BMSCs；观察 ASD对其向成骨细胞分化的影响以及 p38丝裂原激活蛋 白激酶 (p38 MAPK)抑制剂SB203580和细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂 PD098059的干预作用 ；检测 BMSCs分化过程中碱 性磷酸酶 (ALP)活性和骨钙素(oc)含量 ；实时荧光定量PCR检测护骨素(OPG)和核因子 KB受体活化因子配体 (RANKL)mRNA的表达 ；Westernblotting法检测p38MAPK和ERK活性水平。结果：ASD处理后第9d，成骨性分 化标志物OPGmRNA表达量明显增高，RANKLmRNA的表达量明显降低，同时显著提高BMSCs分化为成骨细胞 的AIJP活性和OC的表达 ，而且p38MAPK和ERK活性也显著增加。SB203580和PD098059则显著抑制ASD的成 骨作用。结论：ASD在体外具有促进大鼠BMSCs向成骨细胞分化的作用，这一作用与 MAPK途径的p38MAPK和 ERK蛋白有关。 [关键词] 木通皂苷 D；间充质干细胞 ；成骨细胞；分化；信号通路 [中图分类号] R332 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．08．021 Akebia saponinD promotesdifferentiati0n 0fbonemarrow mesenchymal stem cellsintoosteoblaststhrough M APK signalingpathways ZHANG Yun—hui，LIU Cheng—cheng2 ZHU Ai—zhen2 CHEN Xiao—yu ，LIU Ge— ， ， xiu ．HE Dong—reel。．TAN Guang—xiao (CampusClinic，theFirstAffiliatedHospital，InstituteofHematology，SchoolofMedciine，JinanUnwemity，Guangzhou 510632．China．E—mail：zOO1yh@163．con) fABSTRACT】AIM：ToexploretheroleofAkebiasaponinD (ASD)inthedifferentiationofratbonemarrow— derivedmesenchymalstem cells(BMSCs)intoosteoblasts．METHODS：TheratBMSCswereculturedusingroutine methods．TheeffectsofASD onthedifferentiationofMSCsintoosteoblastswereobserved．Thep38mitogen—activated proteinkinase(p38MAPK)inhibitorSB203580andextraeellularsignal—regulatedkinase(ERK)inhibitorPD098059 wereusedtoevaluatethemechanisms．Theactivityofalkalinephosphate(ALP)andcontentofosteoealcin(OC)wereas— sayedd