脑内Aβ沉积与AD模型大鼠学习记忆能力关系的研究.pdfVIP

· 584 · 主国痘理生理 蠢 ChineseJournalofPathophysiology2010，26(3)：584—586 【文章编号] 1000—4718(2010)03—0584—03 脑 内AIS沉积与 AD模型大鼠学习 记忆能力关系的研究水 王 锋 ， 韩 柏 ， 郭建红 ， 李文星 ， 韩德五 (山西医科大学 细胞生理学省部共建教育部重点实验室，病理生理学教研室， 第一医院精神科，病理学教研室，第二医院普通外科，山西 太原030001) [摘 要] 目的：探讨阿尔茨海默病 (AD)模型大鼠学习记忆能力与脑组织 8淀粉样蛋白(amyloid13一pro． tein，A31)之间的关系。方法：选用雄性Wistar大鼠，腹腔注射D一半乳糖和 A1C1，，连续90d，制备 AD大鼠模型。 给药结束后，通过 Morris水迷宫观察模型大鼠学习记忆能力，免疫组化方法检测 AD模型大鼠脑组织 A31的表达。 结果：AD模型大鼠空间学习记忆能力明显下降，脑组织A31表达水平均较对照组高 (P0．01)。结论：AD模型大 鼠脑内炎症及脑组织A31表达水平升高是导致其学习记忆能力下降的重要原因。 [关键词] 肠源性内毒素血症；脂多糖类；阿尔茨海默病 ；淀粉样 31蛋白 [KEYWORDSJ Intestinalendotoxemia；Lipopolysaccharides；Alzheimerdisease；Amyloidbeta—protein [中图分类号] R363 [文献标识码] A 阿尔茨海默病 (Alzheimersdisease，AD)是一种 以学习、 1d将大鼠放入水池(不含平台)自由游泳2rain熟悉水迷宫 记忆和认知受损为主要特征的神经退行性疾病。目前认为 环境，实验历时5d，每天分上午 (n一1)，下午(n一2)2个时 AD是一种多病因的疾病 ，确切的发病原因未明，在众多发病 间段，每段分别训练4次。训练开始时将平台置于SW 象限， 机制的学说中“AB级联假说 (amyloidcascadehypothesis)” 每个时段分别从池壁4个起始点将大鼠面向池壁放入水池，记 与炎症学说 占有重要的地位。大量体外研究 表明，AD形 录每次找到平台的游泳路径。如大鼠在 120S内找不到平台， 成过程与慢性炎症反应有关。而在体的相关研究却鲜有报 由实验者将其引上平台，潜伏期记为 120S，并记录为 1次寻找 道，为了研究脑内慢性炎症及 A31沉积与 AD模型大鼠学 习 站台错误，每次间隔4rain让大鼠休息，再行下次实验。 记忆能力之间的关系，我们进行了以下实验。 4．2 空间探索实验 在第5d下午第5次训练时拆除水下 平台，然后任选 1个人水点将大鼠面向池壁放入水中，测其 材 料 和 方 法 120S内在各象限的游泳距离及 占总距离的百分率和 120S 1 动物 内跨越各象限平台相应位置次数及 占总次数的百分率，并记 健康雄性Wistar成年大鼠，体重200—250g，由山西医科 录大鼠120S内搜索平台的路线图。 大学实验动物中心提供，标准大鼠饲料常规饲养。 5 大鼠脑组织A阻 一4o表达水平检测 2 仪器设备和试剂 采用免疫组化法。大 鼠脑组织 10％甲醛固定、包埋、切 A311—40单克隆抗体购自DAKO，第 Ⅱ、第Ⅲ抗体及DAB 片，系列乙醇脱蜡 ；蒸馏水冲洗，PBS浸泡5rain；3％HO2去 购 自博士德公司，D一半乳糖 (生化试剂)购 自AMSCO，A1CI， 离子水孵育 10rain，以消除内源性过氧化物酶活性 ；用微波法 (分析纯)购 自广州化学试剂厂，鲎 (LAL)试剂盒购 自上海伊 进行抗原修复；滴加正常山羊血清工作液室温孵育15min封 华临床医学科技公司。