胚胎血管发育早期PDGF-BB对血管平滑肌细胞趋化的影响.pdfVIP

维普资讯 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophvsiology 2008，24(2)：251—256 · 251 · [文章编号] 1000-4718(2008)02—0251—06 胚胎血管发育早期 PDGF—BB对血管 平滑肌细胞趋化的影响 韩雅玲， 肖艳平 ， 齐岩梅 ， 康 建， 徐 凯， 闫承慧 (沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科，辽宁 沈阳 110016) [摘 要] 目的：建立胚胎血管发育早期血管平滑肌细胞 (VSMCs)趋化模型，并观察胚胎血管发育早期血小 板源性生长因子一BB(PDGF—BB)对VSMCs趋化的影响。方法：采用转染平滑肌特异性蛋白SM22ct启动子控制 下表达增强型绿色荧光蛋白(GFP)报告基因载体的胚胎干细胞制备拟胚体，然后接种于under—agarose凝胶作为 平滑肌细胞趋化模型。用慢速视频显微摄像技术观察拟胚体分化后表达 GFP的VSMCs，分析比较不同浓度 PDGF — BB对VSMCs分化和移行的影响。结果：在under—agarose凝胶中，拟胚体在无外源性生长因子存在的条件下可 自发向心肌细胞、内皮细胞和VSMCs分化。拟胚体贴壁分化20d时，对照组及4种浓度PDGF—BB(5 L、10 g／L、20 g／L、50 g／L)组VSMCs的平均迁移速率分别为(94．07±23．80) n／h、(118．08±31．63)I~m／h、(173．53 ±24．58) h、(380．74±39．56) h和 (335．62±32．16)m／h，峰值浓度为20 g／L。经浓度大于 l0 L PDGF—BB处理后，VSMCs向PDGF—BB孔方向移行，对照组、低浓度PDGF—BB组 VSMCs呈不规则性迁移。结 论：该模型能够模拟胚胎血管发育早期全过程 ，可用于研究不同生长因子对 VSMCs趋化的影响。外源性PDGF— BB能定向诱导胚胎血管发育早期VSMCs迁移 ，其定向趋化作用在一定浓度范围内呈量效关系。 [关键词] 胚胎干细胞；血管；平滑肌细胞；趋化作用 ；血小板源性生长因子 [中图分类号] R363 [文献标识码] A ChemotacticeffectofPDGF—BB onvascularsmoothmusclecellsduring earlyembryonicvasculardevelopment HANYa—ling，XIAOYan—ping，QIYan—mei，KANGJian，XUKai，YANCheng—hui (DepartmentofCardiology，ShenyangGeneralHospital，CardiovascularResearchInstituteofP／A，Shenyang110016，Chi· ，．E—mail：hanyal@ma il．sy．In．ca) [ABSTRACT] AIM ：Toestablishachemotacticmodelforvascularsmoothmusclecells(VSMCs)duringeraly embryonicvasculradevelopment，andtoobservethechemomcficeffectofplateletderivedgrowthfactor—BB (PDGF—BB) onVSMCsduringthattime．METHODS：A murineemb ryonicstem celllineexpressingtheenhancedgreenfluorescent protein(GFP)underthetrnascriptionalcontrolofthesmooth—muscle—specificSM22apromoterwasusedtomakeem- bryoidbodies，thenn