肾病综合征患儿PMN凋亡与细胞因子、粘附分子关系的探讨.pdfVIP

维普资讯 理生理杂志 ChineseJournalofP 卫Y 丝( 2；Z二 Zt · 247l · [文章编号] 1000—4718(2006)12—2471—03 肾病综合征患儿 PMN凋亡与细胞 因子、 粘附分子关系的探讨 叶中绿 ， 黄秀兰 ， 陈 日玲 ， 庞伟君 (广东医学院附属医院 儿‘科， 检验科，广东 湛江524001) [摘 要] 目的：观察肾病综合征(Ns)患儿周围血中性粒细胞 (PMN)凋亡的变化，并检测周围血中细胞 因 子 IL一8、IL一6、TNF— 、NO和粘附分子P一选择素(P—se1)、细胞间粘附分子一l(ICAM—1)的水平，探讨细胞因 子和粘附分子对PMN凋亡的影响。方法：采用流式细胞术检测28例Ns病人周围血PMN凋亡 ，ELISA法检测细胞 因子和粘附分子水平。结果：活动期Ns患者PMN凋亡率明显低于健康人对照组和缓解期 Ns患者，缓解期 Ns患 者PMN凋亡率与对照组无明显差别，不同病情活动期NS患者之间PMN凋亡有显著差异，活动期 NS患者周围血 中IL一8、IL一6、TNF— 、NO、P—sel、ICAM—l水平均高于对照组和缓解组，且与PMN凋亡呈负相关 ，与病情呈正 相关。缓解组患者 IL一8、IL一6、TNF— 、NO、P—sel和 ICAM—l水平与对照组无显著差异。结论：NS患者PMN 凋亡延迟 ，且与病情及疗效密切相关。炎性细胞因子产生过多 、免疫细胞粘附分子表达上调可能是导致 PMN凋亡 延迟的重要机制，适度调控 PMN凋亡有可能会改善NS预后。 [关键词] 肾病综合征 ；细胞凋亡；细胞因子类；中性白细胞 [KEYWORDS] Nephroticsyndrome；Apoptosis；Cytokines；Neutrophils [中图分类号] R363 [文献标识码] A 肾病综合征(nephroticsyndrome，NS)的l临床和病理均较 养基 (Gibco公司)，胎牛血清 (杭州四季青生物工程材料研究 为复杂，但发病机制却不清楚，大多认为NS患儿体内存在一 所)，淋巴细胞分离液 (帮定公司)，NO试剂盒 (南京建成生 定的免疫功能失调和由此所致的组织炎症反应及损伤。中 物工程研究所)，IL一8、TNF— 和 IL一6ELISA试剂盒 、P— 性粒细胞 (polymorphonuclearneutrophils，PMN)是一类主要的 selELISA试剂盒和 ICAM—lELISA试剂盒 (深圳 晶美生物 炎症细胞，直接参与炎症性损伤，PMN凋亡是受 自身调控的， 工程有限公司)等。 一 旦凋亡失调，则可存活时间延长从而加重组织损伤。现已 3 样品收集和中性粒细胞的分离 发现 NS患者有单个核细胞凋亡延迟现象，以及细胞 因子在 分别在病人人院时和治疗缓解后取静脉血 10mL用肝 肾炎性损伤中起着重要的作用等…。为了探讨 PMN凋亡在 素抗凝，取3mL分离血浆用于测定细胞 因子和粘附分子，其 NS发病中的作用，以及细胞因子和粘附分子对 PMN凋亡的 余用于分离PMN，方法为：取肝素抗凝血加 1／4体积的6％ dextran(分子量200kD)，混匀后斜置 3O一45min，使红细胞 影响，我们检测了28例 NS患者周围血 PMN凋亡的变化，并 下沉。取上层按 l：l体积 比叠加 到淋 巴细胞分离液上， 同时测定炎性细胞因子 IL一8、IL一6、TNF— 、NO和粘附分 500r／min水平离心30min，将沉淀细胞用 0．83％ NHC1溶 子 P—sel、ICAM—l的水平 。 液破除红细胞。Hanks液洗细胞 3次，计数并调整细胞浓度。 材 料 和 方 法 细胞经涂片染色分类见PMN纯度 93％，台盼蓝拒染法显示