脐血与成人外周血粒细胞Toll样受体表达的比较.pdfVIP

· 676 · 理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiologv 2013，29(4)：676-681 [文章编号】 1000-4718(2013)04-0676—06 脐血与成人外周血粒细胞 Toll样受体表达的比较 出 刘 俊 ‘， 吴 瑕 ， 陈智聪 ，廖继东 ，谷景义 ，杨晓蕾 ，柳国胜 ， 吴 慧 ， 李扬秋 (暨南大学 医学院田家炳医学实验中心，。第一临床医院，医学院血液病研究所 ，广东 广州 510632) [摘 要] 目的：比较脐血与成人外周血粒细胞Toll样受体 (TLRs)的表达情况，为新生儿相关疾病的临床治 疗积累实验资料。方法：取脐血和成人外周血，用密度梯度离心结合红细胞裂解法分离、收集粒细胞 ，流式细胞术 鉴定粒细胞纯度，RT—qPCR检测TLRs10个成员的mRNA表达水平，流式细胞术测定部分TLRs的蛋白荧光强度。 结果：(1)流式细胞术检测结果：采用密度梯度离心结合红细胞裂解法分离收集的脐血粒细胞 CD19一CD24 为 (95．66±1．73)％，CD3为(4．27±1．22)％，成人外周血粒细胞CD19一CD24 为(95．48-i-2．13)％，CD3 为(4．82 ±1．07)％。(2)RT-qPCR结果显示：脐血粒细胞和成人外周血粒细胞 TLR1(0．141±0．091 0．691±0．447)、 TLB2(O．388士0．337vs0．901±0．508)、TLR4(0．093±0．071vs0．254±0．147)、TLR6(0．056±0．045 0．202± 0．034)、1’LR7(0．001±0．001 0．004±0．003)和TLR8(0．406±0．400vs0．211±0．146)的表达差异有统计学意义 (P0．01)，TLR3、TLR5、TLR9和TLR10的表达差异无统计学意义(P0．05)；其中TLR3、TLR7和TLR9在脐血和 成人外周血粒细胞的相对表达水平均较低。(3)流式分析显示脐血与成人外周血粒细胞TLR2平均蛋白荧光强度 (21．40±3．09 30．50±5．69)差异有统计学意义(P0．05)；而TLR4平均蛋白荧光强度差异无统计学意义 (P 0．05)。结论：脐血粒细胞 TLR1、TLR2、TLR4和TLR6mRNA及TLR2蛋白表达低于成人外周血粒细胞，提示新生 儿粒细胞识别细菌性病原微生物感染的能力可能存在缺陷或尚未完全成熟。这是否与新生儿急性细菌性毒血症 发病及病死率较高有直接联系，有待进一步研究。 [关键词] 新生儿；脐血；粒细胞；Toll样受体；基因表达 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2013．40．018 ComparisonofToll-likereceptorexpression in granulocytesfrom umbili— calcordbloodandadultperipheralblood LIUJun ，WU Xia2，CHEN Zhi．cong，LIAO Ji．dong ，GUJing．yi，YANG Xiao．1ei， UU Guo—shengz WU Hui，LIYang—qiu ， (TinKa-ping~nterforMedicalExperiments，SchoolofMedciine， 如 FirstClincialHospital，InstituteofHematology， SchoolofMedciine，JinanUniversity，Guangzhou510632，China．E—mail：tliaojd@jnⅡ．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：TocomparetheexpressionlevelsofToll-likereceptors(TLRs)inthegranuloeytesisolated from umbilicalcordbloodand adultperipheral blood．METHODS：Thegranuloeytesinumbilical bloodn