杞菊地黄汤防治MNU诱导大鼠视网膜变性的早期效应.pdfVIP

维普资讯 国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2006,22(12)：2466-2468 [文章编号] 1000—4718(2006)12-2466一o3 · 短篇论著 · 杞菊地黄汤防治 MNU诱导大鼠 视网膜变性的早期效应 杨 柳。， 李 岱 ， 陈金卯 ， 罗 琳。， 胡世兴 ，‘ 吴开力 (’中山大学中山眼科中心，广东 广州 510060；湖北省咸宁医学院附属医院眼科，湖北 咸宁437100； ’广西医科大学附属医院眼科，广西 南宁530000； 中国中医研究院眼科医院，北京 100040) 【摘 要】 目的：观察杞菊地黄汤在 N一甲基一N一亚硝脲 (MNU)诱导的SD大鼠视网膜变性早期的拈抗效 应。方法：生后46d的雌性SD大鼠3O只随机分为3组 (n=10)：药物组以杞菊地黄汤灌胃，正常组和模型组以等 量蒸馏水灌胃，每 日1次，连续4d。用药后第5d，药物组和模型组大鼠皮下注射 MNU40ms／kg，正常组皮下注射 等量生理盐水做对照。注射后 12h，处死大鼠，每组大鼠的左眼(1O眼)用于透射电镜观察；右眼(1O眼)用于苏木 素一伊红 (hematoxylineosin，HE)染色观察并测量分析视网膜全层及外核层厚度，部分眼球行TUNEL法染色并计 算细胞凋亡百分率。结果：光镜下各组大鼠视网膜组织学未见明显改变，视网膜全层及外核层厚度组间 比较均无 显著差异 (P0．05)。TUNEL法染色见模型组和药物组外核层存在细胞凋亡，正常组未见。电镜下正常组和药物 组光感受器细胞大小和核染色质分布均匀 ；模型组光感受器细胞开始变小，核染色质开始浓缩 ，外节膜盘疏松 ，膜 型不完整。结论：杞菊地黄汤通过抑制细胞凋亡等选择性拮抗MNU对大鼠视网膜光感受器细胞的早期损伤。 [关键词] 中草药；模型，动物；视网膜变性；甲基亚硝脲 [KEYWORDS] Drags，Chineseherbal；Models，animal；Retinaldegeneration；Methylnitrosourea [中图分类号] R363 [文献标识码] A 视网膜变性 (retinaldegeneration，RD)是常见的人类致盲 有限公司生产的中药配方颗粒，加水煮沸溶解 ，药液置4℃ 眼病之一。该病发病机制未明，以光感受器细胞凋亡为其共 冰箱保存备用 (实验时恢复至室温)。按人与大鼠体表面积 同特征 ，目前疗效不确切。中医认为本病多属虚 中夹瘀之 56：1计算给药量，药物浓度为67g／L。正常组和模型组用等 症 ，治疗多从滋补肝肾，填精补髓人手。中药具有对 RD进行 量蒸馏水灌 胃，3组动物每天灌 胃1次，连续4d。用药后第 早期防治的潜在应用价值。 5d，药物组和模型组大鼠按体重 1次性腹腔注射40ms／kg MNU诱导视网膜变性已是较成熟的动物模型_1．2]。我 MNU(N—methyl—N—nitrosoures，Sigma公司产品，溶于生理 们既往观察到MNU作用于大鼠12h后视网膜电图(electro- 盐水)。注射后第 12h，处死动物，摘除眼球，左眼用于电镜 refinogrmn，ERG)已有改变 ；视网膜光感受器细胞也开始发 观察 ，右眼用于HE及TUNEL染色。 生凋亡 。杞菊地黄汤出自清 ·董西园 《医级宝鉴》，是治疗 2 病理切片及观察 肝肾精血不足的名方 ，临床应用广泛。本研究选用此方观察 常规眼球固定、脱水、浸蜡包埋，选取包含视神经的纵切 其对 MNU诱导的sD大鼠视网膜变性早期的影响及拮抗效 面切片行 HE和TUNEL染色 (试剂盒，Roche公司产品及方 应 ，为下一步从分子水平探讨其作用机制奠定基础。 法)。分析时于4OO倍镜下，在HE染色片中利用SPOT—Bas． ic软件分析系统测定视网膜全层及外核层