类风湿关节炎滑膜血管内皮细胞中Smoothened的表达及其意义.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(2)：225-230 · 225 · [文章编号] 1000-4718(2013)02-0225-06 类风湿关节炎滑膜血管 内皮细胞 中 Smoothened的表达及其意义冰 朱尚玲 ， 彭蔚湘 ， 罗敏琪 ， 王明霞 ， 林灼锋 ， 黄建林 (。中山大学附属第三医院风湿免疫科，广东 广州 510630；温州医学院药学院，浙江 温州 325035) [摘 要] 目的：初步观察 SonicHedgehog信号通路分子 Smoothened(Smo)在类风湿关节炎(rheumatoidat— thritis，RA)滑膜血管内皮细胞的表达及其生物学意义。方法：收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织，同 时收集4例外伤或半月板损伤 (无关节炎)者滑膜组织作为对照组，免疫组化检测滑膜组织Smo蛋白表达情况。采 用人脐静脉内皮细胞系EA．hy926作为滑膜血管内皮细胞的模型，予不同浓度肿瘤坏死因子0【(TNF0)【处理，West． ernblotting检测Smo蛋白表达；采用 RNAi技术转染体外合成的特异性 Smo—siRNA，应用 Westernblotting检测沉默 效果 ；转染siRNA24h后，经TNF一 放线菌素 D(actinomycinD，ActD)诱导细胞凋亡，CCK一8法检测细胞存活率， 流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果：RA患者滑膜组织 Smo表达高于对照组，以血管内皮细胞表达尤为明显。 EA．hy926细胞经TNF-刺激后，Smo蛋白表达上调 (P0．05)。RNA干扰 EA．hy926细胞 Smo表达后，细胞存活 率为(24．30±0．45)％，低于阴性对照组的(36．86±0．62)％(P0．05)，细胞凋亡率为(48．00±1．96)％，高于阴 性对照组的(31．70±0．82)％(P0．05)。结论：Smo可能参与了RA患者滑膜组织血管内皮细胞凋亡的调控。 [关键词] 关节炎，类风湿；Smoothened；RNA干扰；内皮细胞；细胞凋亡 [中图分类号] R593 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2013．02．007 Expression ofSmoothenedanditsrolein endothelialcellsin synovialtis． suesofrheumatoidarthritis ZHU Shang—ling ，PENG Wei—xiang ，LUO Min—qi，WANG Ming—xia ，LIN Zhuo．feng ， HUANGJian．1in (Depaamem ofRheumatology，theThirdAffiliatedHospitalof SunYat—senUnwenity，Guangzhou510630，Chi一 眦；PharmacySchool，WenzhouMedicalCollege，Wenzhou325035，China．E—mail：fianlin一@163．corn；zflwf@126． con) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheexpressionofSonicHedgehogsignalingpathway—associatedfactorSmooth— ened(Smo)anditsroleinendothelialcellsinsynovialtissueofactiverheumatoidarthritis(RA)．METHODS：Smoex— pressioninsynovialtissuefrom4RApatientsand4patientswithtraumaormeniscalinjury(withoutarthritis，usedforcon— tro1)wasdetectedbythemethodofimmunohistochemistry．Humanumbi