积雪草提取物对脾淋巴细胞细胞周期及细胞内游离钙的影响.pdfVIP

堡生里盘查 ! 』 0f h叩hysi0log)r2011，27(4)：739—742 · 739 · [文章编号] 1000—4718(2011)04—0739—40 积雪草提取物对脾淋巴细胞细胞周期 及细胞 内游离钙的影响水 龚静青 ， 李 菁 ， 朱伟杰 (暨南大学 医学院病理生理学系 2生命科技学院生殖免疫研究所，广东 广州510632) [摘 要] 目的：观察积雪草提取物对小鼠脾淋巴细胞细胞周期及细胞内游离ca 的影响，并对其免疫调节 作用机制进行初步探讨。方法：采用乙醇浸提、极性萃取分离得到积雪草粗提物，利用Sephadex—LH20凝胶柱层 析进一步分离纯化获得积雪草各组份提取物，通过观察各组份抑制 1，1一二苯基 一2一苦基苯肼 (DPPH)自由基和 羟自由基的抗氧化作用及对脾淋巴细胞增殖的影响，筛选出其活性成份。采用流式细胞术观察此活性成份对脾淋 巴细胞细胞周期影响，并用 Fluo一3／AM荧光探针结合流式细胞术分析积雪草提取物对脾淋巴细胞内游离 ca 影 响。结果：(1)获得进一步纯化并具有抗氧化活性的积雪草提取物D；(2)积雪草提取物D对脾淋巴细胞增殖抑制 作用显著；(3)积雪草提取物 D可降低脾淋巴细胞内游离 ca 浓度，且呈量效关系；(4)积雪草提取物 D能阻滞脾 淋巴细胞进入S期和G：／M期。结论：积雪草提取物抑制小鼠脾淋巴细胞增殖，其作用机制可能是通过降低细胞 内游离ca 浓度从而抑制脾淋巴细胞进入细胞分裂期而发挥作用。 [关键词] 积雪草 ；增殖；细胞周期 ；钙；流式细胞术 [中图分类号] R364．1+4 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．40．022 EffectsofCentellaasiaticaextractsoncellcycleandintracellularfreeca1． cium inspleenlymphocytes ， GONGJing—qing，LIJing，ZHUWei—jie ， (DepartmentofPathophysiology，SchoolofMedicine，InstituteofReproductiveImmunologyResearch，JinanUnive~ity， Guangzhou510632，China．E—mail：tlijing62@126．eom) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectsofCentellaasiaticaextractsonthecellcycleandintracellularfree calcium ([ca ]i)inspleenlymphocytes．METHODS：Centellaasiaticawasextractedwithalcoholanddifferentorganic solvents．Sephadex—LH20gelcolumnchromatographywasappliedforfurtherpurification．Toscreentheactiveconstitu— ents，thescavengingabilityofthefractionsgeneratedbyelutionofchromatorgaphyagainstradicalsofOH ·，DPPH ‘and theiranti—proliferativeeffectsonspleenlymphocytesweremeasured．Toassessthecellcycleand[ca ]iinspleenlym— phocytes，flow cytometrywasperformed．RESULTS：TheDfractionelutedfrom thecrudeextractofCentellaasiaticawas obtain