供肝NK细胞对肝移植免疫反应中NF-κB活性和IL-15表达的影响.pdfVIP

· 2212 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(12)：2212—2217 [文章编号] 1000—4718(2013J12．2212—06 供肝 NK细胞对肝移植免疫反应 中 NF·KB活性和 IL-15表达的影响 钟东佳 ， 黄永亨 ， 龙天柱 ， 俞建东 ， 林泽宇 ， 闵 军 ， 万云乐 (中山大学孙逸仙纪念医院肝胆外科，广东 广州 510120；广东药学院附属第一医院肝胆外科，广东 广州 510080； 广卅I市妇女儿童医疗中心乳腺外科 ，广东 广州510180；中山大学附属第六医院肝胆胰外科，广东 广州 510655) [摘 要] 目的：观察大鼠移植肝组织内和外周血 白细胞介素 15(IL—l5)的表达水平及脾组织内核因子 KB (NF—KB)的表达活性变化，探讨供肝NK细胞减轻肝移植术后急性排斥反应的机制。方法：Lewis大鼠为肝移植供 体，BN大鼠为受体，改良“二袖套”法建立大鼠肝移植模型。应用[co]射线照射清除供体免疫细胞和经门静脉回 输供肝 NK细胞等技术 ，实验设立3组。A组：急性排斥组；B组：单纯[∞co]照射排斥组；c组 ：[co]照射 +供 肝NK细胞门静脉回输排斥组。移植术后第 1、3、7天收集受鼠外周血清，ELISA法检测 IL—l5分泌水平，同时切取 移植肝行病理学检查，Westernblotting法检测移植肝组织 IL一15蛋 白的表达，凝胶 电泳迁移实验 (EMSA)检测受鼠 脾组织NF—KB表达活性。另外每组各设亚组观察移植后大鼠自然生存时间。结果：B组术后大鼠自然存活时间较 A、C组明显缩短，术后发生急性排斥反应程度较 A、c组严重；术后第3、7天，3组受鼠外周血 IL．15水平均较第 1 天时显著升高 ；移植术后第3、7天 ，B组大鼠血清 IL．15浓度均显著高于A、c组；术后第3、7天，移植肝组织中B组 IL一15表达也显著高于A、c组 ，受鼠脾组织中B组NF—KB表达活性亦显著高于A、C组。结论 ：IL一15可能作为肝移 植急性排斥反应的监测指标 ，对急性排斥反应的早期诊断和移植物的预后估计具有临床指导意义；供肝NK细胞可 能通过下调 NF—KB的表达活性来调节 IL．15的水平，进而减轻肝移植术后急性排斥反应。 [关键词] 肝移植；急性排斥反应；白细胞介素 15；NF—KB；自然杀伤细胞 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn2013．12．015 NK cellsfrom donorliverinhibitNF-KB activityandIL-15expressionaf- terlivertransplantation inrats ZHONGDong-jia，HUANGYong—heng，LONGTian—zhu，YUJian—dong，LINZe—yu， MINJun ．WANYun—le (DepartmentofHepatobiliarySurgery，SunYat—senMemorialHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510120，Chi— na；DepartmentofHepatobiliarySurgery，theFirstAffiliatedHospital，GuangdongPharmaceuticalUniversity，Guangzhou 510080，China；DepartmentofBreastSurgery，GuangzhouWomenandChildren’SMedicalCenter，Guangzhou510180， China；DepartmentofHepatobiliaryandPancreaticSurgery，theSixthAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guang— zhou510655，China．E—mail：drwanyl@163．com) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigate