预处理对缺血再灌注损伤鼠肺ACEmRNA表达的影响.pdfVIP

理杂志 ChineseJournalofP!巳! !：i2；!垒!二! Z · l67 · 【文章编号] 1000-4718(2010)01—0167—03 · 短篇论著 · 预处理对缺血再灌注损伤 鼠肺 ACEmRNA表达的影响 伍火志， 袁茂溪 ， 罗常进， 刘 鑫， 袁 江 (遵义医学院第五附属 (珠海)医院，广东 珠海 519100) [摘 要] 目的：探讨预处理对缺血再灌注损伤鼠肺血管紧张素转化酶 (ACE)mRNA表达的影响及肺保护 的机制。方法：建立大 鼠在体肺缺血再灌注损伤模型，24只大 鼠随机分为3组 ，每组 8只。对照 (contro1)组、缺血 再灌注(I／R)组和缺血预处理 (IP)组。测定静脉血中超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA)的量以反映对肺脂 质过氧化的影响，并在光镜下观察肺组织的病理变化，用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法测定血液中内皮素 一l (ET一1)的含量和RT—PCR法检测ACEmRNA的表达。结果：IP组肺组织湿干重比(W／D)明显低于I／R组 (P 0．05)，而 IP组和 I／R组肺组织W／D高于control组 (P0．05)；IP组血清中MDA、ET一1的含量明显低于 I／R组； 而 SOD的含量明显高于I／R组 (均P0．05)。IP组和 I／R组血清中MDA的含量均高于control组，但 SOD的含量 低于control组(P0．05)。镜下观察发现 IP组肺损伤程度较轻。与 I／R组相比较，IP组无论是血中ET一1的含 量还是ACEmRNA的表达都明显下降(P0．05)。结论：IP对缺血再灌注肺损伤具有保护作用。IP对肺损伤的 保护作用机制可能与 IP激活内源性抗氧化作用、灭活或减少氧 自由基、保护肺脏血管内皮的损伤和下调ACEmR— NA的表达有关。 【关键词】 预处理；肺损伤；血管紧张素转换酶；mRNA表达 [KEYWORDS] Preconditioning；Lunginjury；Angiotensinconveningenzyme；mRNAexpression [中图分类号] R363 [文献标识码] A 缺血一再灌注损伤是肺移植后早期移植物功能衰竭的 2．1 动物模型的建立 取大 鼠称重，以5％硫喷妥钠 (8O 发生和导致病人死亡的重要原因。其发生机制尚未彻底阐 mg／kgBW)行大 鼠腹腔麻醉，麻醉成功后，仰卧于手术台上， 明。肺是缺血损伤首选的靶器官之一，其中氧 自由基、钙超 颈部消毒，取正中切Et，依次切开皮肤、皮下筋膜，游离气管 载、自细胞活化、内皮细胞完整性的破坏，细胞代谢紊乱等被 前组织，气管切开插入气管插管并固定，连接小动物呼吸机 认为是引起肺缺血 一再灌注损伤发生发展的主要因素 ’。 (上海奥尔科特生物有限公司)，以通气频率70times／min、潮 对于肺缺血 一再灌注损伤发生机制 以及影响因素的研究和 气量2—3mE／time、吸入气为空气进行控制呼吸。右侧卧位， 认识有利于采取和加强针对性措施预防和治疗肺缺血 一再 消毒左胸部皮肤，沿胸骨左缘切断第 3、4、5肋骨，打开胸腔， 灌注损伤，从而减少早期移植物功能衰竭 的发生率和死亡 游离左肺门，静脉注射肝素 (1mg／kg)抗凝 ，止血钳穿过阻 率，提高肺移植的成功率和生存率。本实验 旨在通过研究预 断，在体鼠I／R损伤模型制备完成。阻断左肺门终止血供及 处理对缺血再灌注损伤 鼠肺血管紧张素转化酶 (angiotensin 通气造成左肺缺血，达预定时间后松开阻断带恢复血供及通 conveningenzyme，ACE)mRNA表达的影响．进一步探讨预 气形成再灌注。丽 control组术中仅左侧开胸和左肺 门穿阻 处理的肺保护机制。 断带，IP组于阻断左肺 门前给予重复 3次的5min缺血和5 min灌注的处理，余同I／R组。 材 料 和 方 法