远志皂苷元对氧化应激损伤的视网膜神经节细胞的保护作用.pdfVIP

生国痘理生理 蠢 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(6)：1091—1096 [文章编号] 1000—4718(2012)06—1091—06 远志皂苷元对氧化应激损伤 的 视网膜神经节细胞的保护作用 别 曼 ， 徐 颖 ， 胡慧玲 ， 逯 丹 ， 朱丽红 ， 戚仁斌 ， 王华东 ， 陆大祥 (。暨南大学医学院病理生理学系，暨南大学脑科学研究所，国家中药管理局三级科研实验室， 暨南大学 一香港大学脑功能与健康联合实验室，广东 广卅I510632；中山大学中山眼科中心，广东 广州 510060) [摘 要] 目的：观察远志皂苷元 (senegenin，Sen)对氧化应激损伤的视 网膜神经节细胞(retinalganglion ceils，RGCs)的影响并初步探讨其作用机制。方法：采用上丘荧光金逆行标记 RGCs后 ，体外原代 RGCs混合细胞 培养 ，随机分为control组、H 0 组、Sen+HO 和Sen组。检测带荧光金荧光细胞的活力。同上述分组处理视网 膜 ，用Hoeehst33258染色后观察视网膜细胞核形态的变化，Westernblotting检测视网膜细胞 cleavedeaspase一3、细 胞色素C及Bcl一2蛋白的表达。结果：与control组比较，Sen浓度在 10、2O和40~mol／L时，RGCs活力无明显变 化(P0．05)，但Sen浓度达到80和 160~imol／L时，RGCs活力明显下降，差异显著(P0．01)。25、50、100和200 Ixmol／LH2O2明显降低 RGCs活力 (P0．05)。Sen浓度在 1O、20和40I~mol／L时，对 50txmolfLH2O2损伤的 RGCs有较好的保护作用(P0．05)，其中40I．~mol／LSen保护作用最为明显。Hoechst33258染色表明Sen可以减 少HO 引起的视网膜细胞凋亡。Westernblotting结果表明Sen促进 Bcl一2蛋白的表达，降低线粒体细胞色素 C 的释放，下凋cleavedcaspase一3的表达。结论：Sen保护RGCs对抗氧化应激引起的损伤，其机制可能与其增强Bcl 一 2蛋白表达和减少氧化应激引起的细胞凋亡有关。 [关键词] 视网膜神经节细胞 ；远志皂苷元 ；氧化性应激 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．06．024 Protectiveeffectofsenegenin onretinalganglion cellsin oxidativestress induced ln ． ury 1 BIEMan， XUYing，HUHui—ling，LUDan，ZHULi—hong，QIRen—bin，WANG Hua—dong ．LU Da—xiang (DepartmentofPathophysiology，InstituteofBrainResearch，KeyLaboratoryofStateAdministrationofTraditionalChinese Medicine，SchoolofMedicine， 加nUniversity，JointLaboratoryforBrainFunctionandHealth，JinanUniversityand The UniversityofHong ，Guangzhou510632，China；ZhongshanOphthalmologicalCenter，SunYat—senUniversity， Guangzhou510060，China．E—mail：ldx@jnu．edu．ca) [ABSTRACT] AIM ：Toevaluatetheeffectofsenegenin(Sen)onH2O2一treatedretinalgangliOncells(RGCs) nadtoexploreitsunderlyingmechanisms．METHODS：RGCswereretro