越桔原花青素调控脑胶质瘤细胞生长的机制研究.pdfVIP

堡生理盘查 ne m{ofPathophysiology 2014，30(4)：603-608 · 603 · [文章编号] 1000-4718(2014)04—0603-06 越桔原花青素调控脑胶质瘤细胞生长的机制研究 钟 越 ， 齐 玲 ， 沈 楠， 王玮瑶， 田 晶， 王艳春 (吉林医药学院，吉林 吉林 132013) [摘 要] 目的：探讨越桔原花青素对脑胶质瘤细胞生长的影响。方法：培养脑胶质瘤c6细胞，将其分为对 照组以及 l0、20和4O g／L越桔原花青素组，MTF法检测药物对c6细胞生长的影响，倒置显微镜观察细胞生长的 变化 ，Annexinv／PI染色检测细胞凋亡率的变化 ，免疫细胞化学法检测 Bcl-2与Bax蛋白表达 ，Westernblotting检测 Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达。结果 ：在24、48和72h时，1O、2O和4O g／L越桔原花青素均抑制 c6细胞的生 长 ，24和48h时 40 g／L越桔原花青素组、72h时 20和4O g／L越桔原花青素组细胞生长明显受抑制 (均PO．01)；倒置显微镜观察发现，各药物组细胞密度随药物浓度升高而减少；AnnexinV／P1分析显示，细胞的 凋亡率亦随着药物浓度的增加而明显增加 ；细胞免疫组化结果显示 ，10、20和40 g／L越桔原花青素组中，c6细胞 表达Bcl-2蛋白减少，表达 Bax蛋白增加 ，但均无明显差异 ；Bax／Bcl-2的比值随着药物浓度升高而增加 (P0．05或 P0．01)；Westernblotting结果显示，10、2O和4O g／L越桔原花青素组中，随着药物浓度升高，细胞表达 Bcl-2蛋 白减少 (P0．01)而Bax和caspase-3蛋白表达均增加 ，Bax／Bcl-2的比值也明显增加 (P0．01)。结论 ：越桔原花 青素抑制脑胶质瘤 c6细胞的生长，其作用机制与调控Bax蛋白增加和Bcl-2蛋白减少，他 Bax／Bcl-2比值增加，从 而激活easpase-3，诱导凋亡发生有关。 [关键词] 越桔原花青素；神经胶质瘤 ；Bax蛋白；Bcl-2蛋白；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 [中图分类号] R739．4 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000．4718．2014．40．005 EffectofVaccinium vitisprocyanidin onregulation ofgliomacellgrowth ZHONGYue，QILing，SHENNan，WANGWei—yao，TIANJing，WANGYan·chun (linMedicalCollege，Jilin132013，China．E—mail：qilingl718@163．corn) [ABSTRACT] AIM：ToexploretheeffectofVacciniumvitisprocyanidinonthegrowthofgliomacells．METH- ODS：GliomaC6cellswereculturedanddividedintocontroland10，20and40i~g／LVaccinium vitisprocyanidingroups． TheinfluenceofVaccinium vitisprocyanidinonthegrowthofC6cellswasmeasuredbyMTrassayandtheobservationan· derinvertedmicroscope．Th eapoptotieratewas detectedbyAnnexinV／PIstaining．TheproteinexpressionofBcl-2and Baxwasdeterminedbyimmunocytochemistry．Th eproteinlevelsofBcl-2，Baxandeaspase-3werealsoexaminedbyWest— ern blotting．RESULTS：ThegrowthofC6gliom