维拉帕米减轻脂多糖导致的大鼠胰腺腺泡细胞损伤机制的研究.pdfVIP

维普资讯 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 垫 (2； 二 墨 [文章编号] 1000-4718(2007)03一O444-05 维拉帕米减轻脂多糖导致的大鼠胰腺 腺泡细胞损伤机制的研究木 张 红。， 李永渝 (陕西中医学院病理生理学教研室，陕西 成阳712046； 同济大学医学院病理生理学教研室，上海 200092) [摘 要] 目的：研究维拉帕米 (Vera)对脂多糖 (LPS)导致的大鼠胰腺腺泡细胞损伤的拮抗作用及其机制。 方法：胶原酶法分离大鼠胰腺腺泡细胞，预先经Vera(50mg／L、100mg／L)处理 15min后，再经LPS(10mg／L)或 正常培养液处理 ，在不同的时点(30min、1h、4h、10h)采集上清液，检测其中丙二醛含量、超氧化物歧化酶、磷脂酶 A：的活性；采用 MrI．I法检测胰腺腺泡细胞的活性 ；部分胰腺腺泡细胞经Fluo一3／AM负载后 ，于相应的时点采用灌 流方式给予药物或刺激剂 ，激光共聚焦显微镜观察单个胰腺腺泡细胞 [ca2]i的变化。结果：Vera可减轻 LPS所 致的细胞损伤 (P0．05)；抑制LPS诱发的胰腺腺泡细胞 [Ca2]i升高(P0．05)；降低细胞培养上清液中丙二醛 含量和磷脂酶A 的活性、增强超氧化物歧化酶的活性。结论：Vera可能通过抑制钙超载 、增强抗氧化能力以及减 少胰酶活化的机制，减少LPS所致的胰腺腺泡细胞损伤，从而发挥对胰腺腺泡细胞的保护作用。 [关键词] 维拉帕米 ；脂多糖类；胰腺；钙 [中图分类号] R363 [文献标识码] A M echanismsby which verapam ilprotectsagainstlipopolysaccharide-· inducedpancreaticacinarcelldamagein vitro ZHANG Hong ，LIYong—yu (DepartmentofPathophysiology，ShanxiCollegeofChineseTraditionalMedicine，Xianyang712046，China；Department ofPathophysoilogy，MedcialCollegeofTon~iUniversity，Shanghai200092，China．E—mail：liyongyu@mail：tona1． edu．ca) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetheprotectiveeffectofverapamil(Vera)onlipopolysaceharide(LPS)一in- ducedpancreaticacinidamageanditsmechanism．METHODS：Ratpna creaticacinarcellswereisolatedbycollagenase digestionandwerepre—treatedwithVera(50mg／L，100mg／L)，thenexposedtoLPS(10mg／L)ornormalculture media，respectively．Atvarioustimepoints(30min，1h，2h，4h，10h)aftertreatmentoftheagents，cellviabilitywas determinedbyMTFnadsupomatantofcellcultureWascollectedtomeasurerthecontentofmaloidialdehyde(MDA)，the activityofsuporoxidedismutase(SOD)nadphospholipase(PLA2)．Somecellswere loadedwithFho一3／AM，nadhte dy,~ icchnageof[ca2]iinsinglepancreaticacinarcellWasdeterminedbylaserscnaningconfocalmicroscopy．R ~