人突变p27基因对大肠癌细胞生物学行为的影响.pdfVIP

维普资讯 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007，23(10)：2039—2041 · 2039 · [文章编号】 1000—4718l2007)10—2039—03 人突变 p27基因对大肠癌细胞生物学行为的影响米 陈 堵 ，徐少勇 ， 邓长生 ， 王家宁 ， 黄云章 (郧阳医学院附属人民医院消化内科，湖北 十堰442000； 武汉大学中南医院消化内科 ，湖北 武汉430071) [摘 要] 目的：观察人突变 p27基因(p27mt)对人大肠癌细胞生长的影响，探讨p27mt基因在大肠癌基因 治疗中的作用及可能机制。方法：以携带突变 p27基因复制缺陷型腺病毒 (Ad—p27mt)为载体，转染大肠癌细胞 SW480；Westernblotting方法检测 p27mt蛋白的表达；细胞计数法检测 p27mt对 SW480细胞生长的抑制作用；用流 式细胞仪检测细胞周期 ；用DNA片段分析法检测细胞凋亡。结果：Ad—p27mt转染SW480细胞后 ，p27在细胞 中 出现了蛋白高表达 ；77．96％的细胞阻滞于G。／G 期，而Ad～LacZ组及空白对照组分别为27．57％和25．29％；生长 曲线显示 Ad—p27mt对细胞生长有明显 的抑制作用 ；DNA片段分析示 p27mt基因可诱导细胞的凋亡。结论： p27mt对细胞周期有明显的阻滞作用，主要阻滞于G。／G 期；p27mt基因对细胞的生长抑制机制与诱导细胞凋亡和 细胞周期的阻滞有关。 [关键词] 结直肠肿瘤 ；基因，p27mt；细胞凋亡 ；细胞周期 【中图分类号] R735．3 [文献标识码] A Influenceofhumanmutantp27geneonthebiologicalbehaviorsofcolor- ectalcancercells CHENJun ，XUShao—yong ，DENGChang—sheng ，WANGJia—ning，HUANGYun — zhang (DepartmentofGastroenterology，PeoplesHospital，YunyangMedicalCollege，Shiyan442000，China； Departmentof Gastroenterology．ZhongnanHospital，WuhanUniversity，Wuhan430071，China．E—mail：sycj@sycatv，net) [ABSTRACT] AIM：Toobservetheinfluenceofhumanmutantp27gene(p27mt)onthegrowthandSOastoin— vestigatethefunctionandmechanism ofp27mtingenetherapyforcolorectal cancer．M ETHODS：Colorectalcancercell lineSW480wasinfectedwithrecombinantreplicationdefectiveadenovirusAd—p27mt，andexpressionofp27mtprotein Was detectedbyW estern blotting．Theinhibitoryeffectofp27mtonSW480andcellcycleweredeterminedbyflow cytome— try ，andDNA fragmentWas analyzed toidentifytheoccurrenceofapoptosis．RESULTS：AftertransfectedwithAd— p27mt，p27proteinWas highlyexpressedinSW480cells，77，96％ colorectal cancercellswere blockedinphaseG0／G1， whileinAd—LacZgroupnadblankcontrolgroup，27．57％