孕酮调节乳腺癌耐药蛋白的机制研究.pdfVIP

· 344 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(2)：344 —348 [文章编号] 1000—4718(2012)02—0344—05 · 短篇论著 · 孕酮调节乳腺癌耐药蛋 白的机制研究 张玉华 ， 李 光， 俞 进， 徐妙生， 李洪利 (首都医科大学附属北京天坛医院病理科，北京 100050) [摘 要] 目的：探讨孕酮调控乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达的机制。方法：通过米托蒽醌 (MX)诱导或基 因转染的方法，作用于孕酮受体 (PR)阳性的T47D和 PR阴性的MDA—MB一231乳腺癌细胞系，建立由BCRP启 动子或巨细胞病毒(CMV)启动子启动表达 BCRP的4种耐药细胞系T47D／MX、T47D／CMV—BCRP、MDA—MB一 231／MX和MDA—MB一231／CMV—BCRP，将孕酮加入耐药细胞的培养液中，通过RT—PCR、Westernblotting及MX 外排实验观察其对不同耐药细胞系BCRP表达的影响。结果 ：孕酮可以剂量依赖方式明显上调 PR阳性的乳腺癌 细胞系T47D／MX中BCRPmRNA和蛋白的表达，细胞中MX的荧光强度明显减弱。而对照组T47D／CMV—BCRP、 MDA—MB一231／MX和MDA—MB一231／CMV—BCRP细胞系，各组处理前后相 比，BCRP的表达量无明显变化。 结论：孕酮可能通过PR的介导与BCRP启动子上游调控序列中的孕激素反应元件 (PRE)结合，激活BCRP基因的 启动子而增强 BCRPmRNA的转录，正性调节 BCRP蛋白的表达和功能。 [关键词] 乳腺癌耐药蛋白；孕酮；启动子；孕激素反应元件；基因调控 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．02．028 Progesteronemodulatesbreastcancerresistanceproteinin breastcancer cells ZHANGYu—hua，LIGuang，YU Jin，XUMiao—sheng，LIHong—li (DepartmentofPathology，BejiingTiantanHospital，CapitalMedicalUniversity，Beijing100050，China．E—mail：yuhua— zhangl11@yahoo．com．ca) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheregulatoryeffectofprogesteroneonbreastcancerresistantprotein (BCRP)inbreastcarcinomacells．METHODS：Thedrug—resistantbreastcancercelllineswereconstructedbymitox- antrone(MX)inductionstepbysteporrecombinnatplasmidtransfeetion．Theprogesteronereceptor(PR)一positiveT47D andPR—negativeMDA —MB 一231breastcancerlineswereused．FourBCRP expressingcelllinesT47D／MX，T47D／ CMV —BCRP．MDA—MB--231／MX andMDA —MB一231／CMV —BCRPwereestablished．inwhichBCRPwasdriven byaBCRPpromoter，andacytomegalovirus(CMV)promoterwasusedascontro1．Thedrug—resistantcellsweretreated withprogesterone．Theexp