载脂蛋白（a）对血管平滑肌细胞增殖及其信号通路的影响.pdfVIP

· 2122· 主国痘堡生理 志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(11)：2122—2125 [文章编号] 1000—4718(2009)11—2122—04 载脂蛋 白(a)对血管平滑肌细胞增殖及其 信号通路 的影响术 危春英， 王梦洪， 魏云峰， 郑泽琪， 彭景添， 黄 俊， 文 渊， 吴志勇 (南昌大学第一附属医院心血管内科，江西 南昌330006) [摘 要] 目的：探讨载脂蛋 白(a)[apo(a)]对血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制。方法：原代培养血管 平滑肌细胞并给予传代以进行实验，并采用Ot—actin抗体进行免疫组化细胞鉴定；分别给予apo(a)、apo(a)+整合 素 v 单克隆抗体 LM609及单独 LM609干预细胞，采用细胞计数和MqT实验观察细胞增殖情况，采用 Western blotting分析相关信号蛋白的变化。结果：所用实验细胞经鉴定均为血管平滑肌细胞；apo(a)能促进血管平滑肌细 胞增殖 ，但这一作用能被整合素 v 单克隆抗体LM609所对抗 ，单独的LM609干预对细胞生长并无影响；West— ernblotting显示apo(a)能促进黏附斑激酶 (FAK)磷酸化，并使总的转化生长因子B (TGF—p。)及其磷酸化形式均 表达减少 ，而LM609能对抗 apo(a)的这些作用。结论：Apo(a)促进血管平滑肌细胞增殖的作用是通过整合素Ot 介导的，以致FAK活化，进而TGF—p。表达及磷酸化均减少。 [关键词] 载脂蛋白A类；血管平滑肌细胞 ；细胞增殖；转化生长因子B [中图分类号] R541．4 [文献标识码] A Effectsofapolipoprotein (a)onvascularsmoothmusclecellsprolifera- tionandcellsignaltrausductionpathway WEIChun—ying，WANGMeng—hong，WEIYun—feng，ZHENG Ze—qi，PENG Jing— tian，HUANG Jun，WEN Yuan，WU Zhi—yong (DepartmentofCardiology，TheFirstAffiliatedHospitalofNanchangUniversity，Nanchang330006，China．E—mail： wcy666888@126．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectandthemechanismofapolipoprotein(a)[apo(a)]onprolifera— tionofvascularsmoothmusclecells(VSMCs)．METHODS：AllVSMCsusedinexperimentswereserialsubcuhuredfrom primarycellsandwereidentifiedby immunohistochemistrystainingof —actin．Cellgrowth assaywasobservedascell countingnadMTI?assay．Western blottingWas alsoemployedtodetecttherelatedmechanism．RESULTS：Allcellsused inexperimentswereconfirmedasVSMCs．Althoughapo(a)enhancedVSMCsproliferation，thiseffectWas attenuatedby anti—integrin vp3，LM609．UsethesereagentsalonehadnoeffectonVSMCsgrowth．TheresultsofWesternblotting demonstratedthatfocaladhesionkinase(FAK)wasactivatedbyapo(a)andtheexpressionoftotalorphosphorylated transfomringgrowth