再灌注大鼠心肌线粒体膜电位及细胞凋亡的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(9)：1559—1566 · 1559 · [文章编号] 1000—4718(2014)09—1559．08 西洋参茎叶总皂苷对缺血 ／再灌注大鼠心肌 线粒体膜 电位及细胞凋亡的影响 李 冬 ， 刘 蜜 ， 陶天琪 ， 宋丹丹 ， 刘秀华 ， 史大卓 (。北京中医药大学，北京 100029；解放军总医院病理生理学研究室，北京 100853； 中国中医科学院西苑医院心血管病中心，北京 100091) [摘 要] 目的：研究西洋参茎叶总皂苷 (PQS)对大鼠缺血／再灌注 (I／R)损伤后心肌细胞凋亡的影响，并 从线粒体膜电位 (△1l，)及线粒体凋亡通路探讨其可能的机制。方法：健康雄性 SD大鼠90只，随机分为假手术 (sham)组、模型(I／R)组、PQS(200mg·kg～ ·d。。，灌 胃6周)+I／R组、环孢霉素A (CsA；l0mg·kg～，再灌前 10min腹腔注射)组、CsA+I／R组和 PQS+CsA+I／R组，各组 n=15。除sham组和CsA组大鼠开胸后冠状动脉左 前降支(LAD)下穿线不结扎外，其余各组大鼠常规麻醉后 ，结扎LAD30min，再灌注 120min复制 I／R模型。生化 分析仪测血清乳酸脱氢酶(LDH)含量，氯化三苯基四氮唑(qTC)和伊文思蓝双染法测心梗面积，原位缺 口末端标 记法 (TUNEL)检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况，Westernblotting检测细胞凋亡相关蛋白的表达。采用JC-1作为荧 光探针 ，用激光共聚焦显微镜和荧光酶标仪测定△1l，水平。结果：与 sham组比较，I／R组血清LDH活性、心梗面 积和心肌细胞凋亡率均显著升高(P0．05)；与 I／R组相 比，PQS+I／R组 、CsA+I／R组和PQS+CsA+I／R组血清 LDH活性、心梗面积和心肌细胞凋亡率均显著降低 (P0．05)。Westernblotting结果显示，与sham组相比，I／R组 心肌Bc1．2蛋白表达量降低，Bax、胞浆cytochromeC和cleavedeaspase-3升高(均P0．05)；与 I／R组相比，PQS+L／ R组、CsA+I／R组和PQS+CsA+I／R组心肌 Bcl·2蛋白表达量升高 ，Bax、胞浆cytochromeC及心肌 cleavedcaspase- 3蛋白表达量均降低(P0．05)。激光共聚焦显微镜观察结果示，I／R组线粒体JC一1染色后红色荧光强度减弱，荧 光酶标仪测相对荧光单位 (RFU)较sham组降低 (P0．05)；PQS+I／R组、CsA+I／R组和PQS+CsA+I／R组RFU 均较 I／R组升高(P0．05)。结论 ：PQS显著降低大鼠I／R后心肌细胞损伤 ，减少细胞凋亡，其机制与维持再灌注 期 △ 稳定 、抑制线粒体凋亡通路的激活有关。 [关键词] 西洋参茎叶总皂苷 ；缺血／再灌注；线粒体膜电位；细胞凋亡 [中图分类号] R363．1 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2014．09．004 EffectsofPanaxquinquefolium saponinonmitochondrialmembranepo- tentialandcardiomyocyteapoptosisin ischemia／reperfusionrats LIDong ，LIU Mi，TAO Tian．q：i，SONG Dan．dan ，LIU Xiu—hua ，SHIDa．zhuo。 (BeringUnive~ityofChineseMedicine，Bejiing100029，China；DepartmentofPathophysiology，ChinesePLAGeneral Hospital，Beoing100853，China；CenterforCardiovascularDisease，XiyuanHospital，ChinaAcademyofChineseMedical