无创及有创方法在哮喘小鼠气道反应性检测中的应用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJoumalofPathophysiology 2009，25(7)：1451—1453、1456 · 1451 · [文章编号] 1000—4718(2009)07—1451—04 · 实验技术 · 无创及有创方法在哮喘小鼠气道 反应性检测中的应用 丁礼仁 ， 王 凯 ， 徐卫华 ， 李阿娜 沈华浩 (浙江大学医学院附属第二医院呼吸内科，浙江 杭州 310009；浙江省立同德医院呼吸内科，浙江 杭州310012) [摘 要] 目的：观察无创和有创方法在检测哮喘小鼠气道高反应性 (AHR)中的应用。方法：以卵白蛋 白 激发制备C57BL／6小鼠哮喘模型 ，分为哮喘组、生理盐水对照组及地塞米松 (DXM)处理组 ，均以有创和无创方法 测定气道反应性 (AHR)，无创方法采用Buxco系统，测量指标为 Penh；有创方法选取气管插管，以肺阻力为测量指 标。同时收集肺泡灌洗液 (BALF)做炎症细胞分类计数 ，肺组织做病理切片染色进行图像分析。结果：(1)和生理 盐水对照组相比，OVA激发后 BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞数均明显升高，DXM处理后可显著降低；(2)OVA组 支气管／血管周围炎症细胞浸润程度明显高于生理盐水对照组 ，DXM处理后炎症细胞浸润程度可以明显减轻 ；(3) Penh和肺阻力测量结果，经重复测量及方差分析后显示无论在不同激发药物之间，还是不同组间，其主效应均存在 显著差异(P0．01)。在25g／L和50 L乙甲酰胆碱 (Mch)激发时，OVA组的Penh比值显著高于Ns组，而DXM 组显著低于OVA组。结论：肺阻力和Penh有很好的相关性 ，可以用于评价哮喘小鼠模型的AHR水平。 [关键词】 哮喘；气道反应性；小鼠 [KEYWORDS] Asthma；Airwayresponsiveness；Mice [中图分类号] R363 [文献标识码] A 支气管哮喘(简称哮喘)是一种反复发作的慢性气道炎 Aspira小动物呼吸机(Harvard)，Medlabl2．0生物信号处理系 症性疾病 ，具有可逆性支气管收缩、气道反应性增高、嗜酸性 统 (南京美易科技有限公司)，造模用呼吸雾化器 (Boehringer 粒细胞募集和黏液高分泌等特征 0J。由于条件的限制，许 Ingelheim，RP6872Issue1)，低温离心机 (eppendoffcentrifuge， 多关于哮喘特点的研究都在动物模型上进行。一个理想的 5417R)，光 学显微镜 (Olympus)，酶标仪 (BIO—TEK， 哮喘动物模型，不仅具备哮喘慢性气道炎症的组织病理学改 ELX800)，石蜡切片机 (MICROM，HM325)，LeicaQwin计算机 变 。更重要的是同时要具有其病理生理学的特点。气道高反 图像分析系统 (Leica)。动物致敏、激发及药物干预C57BE／ 应性 (airwayhyperresponsiveness，AHR)是哮喘的主要病理生 6小 鼠分 3组，每组 12只。(1)A组 ：OVA致敏激发组 理特征 ，其大小不仅能反映哮喘的严重程度，而且对于哮喘 (OVA组)。参照 Hamelmann等的方法 建立哮喘小 鼠模 的诊断、治疗及疗效评估等方面具有十分重要的意义。小鼠 型，于第0d与第 14d每只小鼠分别腹腔注射致敏液0．2mL 在抗原致敏及激发后会导致 AHR，对小 鼠进行AHR测定有 (0．08％OVA0．1mL与等体积液态铝混合)，第24d、25d、26 助于进一步研究哮喘的发生机制及免疫和病理生理机制，因 d，将小鼠置于一密闭容器 (20cm×40cm×50cm)中，以1％ 此具有重要意义 J。本次研究中，我们在 以往建立的哮喘小 OVA溶液 10mL雾化吸入，每天1次。(2)B组：生理盐水对 鼠模型基础上，用有创和无创的方法，在同一小鼠上分别测 照组 (NS组)：造模程序同OVA组，但以等体积NS代替OVA 量其AHR，并观察了地塞米松干预后对 AHR及组织学改变 作致敏激发。(3)C组：地塞米松治疗组 (DXM组)：造模程 的影响。