在体皮层扩散性抑制动物模型的建立.pdfVIP

维普资讯 · 2494· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007，23(12)：2494—2496 [文章编号] 1000—4718(2007)12—2494—03 在体皮层扩散性抑制动物模型的建立 胡学斌 ，冯 哲 ， 李鹏程 ，赵洪洋 ， 朱贤立 (华中科技大学协和医院神经外科，湖北 武汉430022；华中科技大学生命科学院，湖北 武汉430074) [摘 要] 目的：用KC1和针刺分别在鼠皮层诱导皮层扩散性抑制(CSD)，建立大鼠CSD动物模型，为进一 步研究奠定基础。方法：采用 Spangue—Dawley大鼠25只，随机分为针刺诱导组 (n=10)、KC1诱导组 (n=10)和 NaC1对照组 (n=5)，在大鼠颅骨上分别钻磨出诱导窗口和观测窗口，分别在诱导窗口用针刺和滴加 KC1诱导大鼠 脑CSD，对照组在诱导窗口滴加NaC1，并用电生理记录和光学成像的方法来描记CSD的产生与传播，并分析其特 点。结果：针刺诱导组和KC1诱导组在观测窗口均可以观察到向外周扩散的弧形波，观测窗口均可以观察到明暗 相间的弧形波向远处扩散 ，针刺诱导的CSD波呈典型的同心圆样向四周均匀扩散，KC1诱导的CSD波则是呈不规 则的圆弧形波向外周扩散 ，针刺组每次只诱发 1次CSD波 ，而KC1组则可以诱导多次CSD波。在产生CSD波的同 时，伴随着去极化电位的产生，而在 NaC1对照组没有这一现象的发生。结论：用本方法制作CSD动物模型，简单易 行，可以用OISI直观观测 CSD的产生和发展，并与电生理观测到的去极化波一致，适于在体研究CSD，为进一步研 究CSD的发生机制及其可能的作用提供了一种有效手段。 [关键词] 皮层扩散性抑制；模型，动物 ；电生理学；光学成像 [KEYWORDS] Corticalspreadingdepression；Models，animal；Electrophysiology；Opticalima~ng [中图分类号] R363 [文献标识码] A 皮层扩散性抑制 (corticalspreadingdepression，CSD)现 控制其体温 (直肠温度)在 (37．0±0．5)℃。实验过程中利 象于 1944年 由Leao…首次发现并加 以描述，认为是大脑皮 用 PCLab生物信号采集系统及相应的传感器连续监测大 鼠 层对各种有害刺激 的反应。在正常大脑，CSD过程是可逆 股动脉血压、心率 、直肠温度等生理参数，保证实验过程中各 的。以往对CSD的研究主要是在离体标本上进行，这些标本 参数处于正常范围。 从取材、制备、培养到实验都需要较高的要求，实验过程也很 2 制备方 法 复杂，成功率也不够高；且多采用传统的电生理方法来研究 大鼠麻醉后俯卧位固定于脑立体定位仪上，沿顶部正中 CSD，随着脑功能成像技术的发展，尤其是基于脑皮层活动内 矢状线切 口，剪开皮肤及浅筋膜，暴露额叶及顶枕叶颅骨，在 源信号的光学成像术(opticalimagingofintrinsicsignal，OIlS) 额骨前囟前 1—3mm、侧面 2—4mm用骨钻钻孔 (直径 3 是 目前为止具有最高空间分辨率 (20—100 m)和适用的时 mm，为诱导 CSD窗口)，保持硬脑膜的完整；顶骨前囟后2—6 间分辨率 (毫秒级)的一种活体脑功能成像技术。为大范围 mm、侧面2—6mm用牙科钻打磨 (大小6mm×8mm，基本覆 皮质的功能构筑研究提供了有力的工具。其成像原理是在 盖顶一枕叶皮层，为观测CSD窗口)，打磨过程中不时用生理 一 定的刺激条件下，脑内神经元的兴奋，将可能引起神经元 盐水冷却钻头，直至骨片变得透明，皮层上血管清晰可见 快速的神经活动，同时神经元代谢活动的骤增 ，致血红蛋 白 (图1)，磨薄后的颅骨厚度一般小于 100 m。 含量升高，使局部脑组织对特定波长光的吸收率发生变化， 3 CSD诱导 分析上述光信号在某一时间段内的空间分布 ，来间接表征脑 针刺组采用机械针刺的方法诱导 CSD，在诱导窗 口的小 部功能活动的状况 J。为此 ，我们建