早期凋亡的T淋巴细胞诱导生成耐受性树突状细胞的实验研究.pdfVIP

维普资讯 _中垦痘堡生理鍪盍 望seJoumalofPathophysiology 2007，23(9)：1817—1822 · 1817 · [文章编号】 1000—4718(2007)09—1817—06 早期凋亡的T淋巴细胞诱导生成 耐受性树突状细胞的实验研究 张文瑾， 郑树森 ， 谢海洋 (浙江大学附属第一医院肝胆胰外科，卫生部多器官联合移植重点实验室，浙江 杭州310003)) [摘 要】 目的：探讨早期凋亡T淋巴细胞的抑制性免疫调节性能。方法：采用定时紫外线照射诱导T淋巴 细胞早期凋亡，深低温反复冻融获得坏死 T淋巴细胞。体外诱导、纯化并培养骨髓源性不成熟树突状细胞 (im． DCs)，imDCs分别和早期凋亡或坏死 T淋巴细胞共培养。用流式细胞仪、双夹心ELISA、[H]掺入混合淋巴细胞 反应等方法分析imDCs吞噬早期凋亡或坏死T淋巴细胞后，在不同处理条件下，MHC—II、CIM0、CD80、CD86的表 达水平、分泌IL一12p70以及刺激T淋巴细胞增殖能力的差异。结果：imDCs和坏死细胞碎片共培养后明显趋于 成熟，其MHCII和CIM0、CD80、CD86的表达水平显著上调；分泌较高水平的IL一12p70；和同种异体处女T淋巴细 胞混合培养后显著刺激处女T淋巴细胞增殖。imDCs和早期凋亡的T淋巴细胞共培养后，其MHC—II、CIM0、 CD80和CD86的表达维持较低水平；仅分泌较低水平IL一12p70；和同种异体处女T淋巴细胞混合培养后不能刺 激淋巴细胞增殖。此外，早期凋亡的T淋巴细胞孵育上清显著抑制了吞噬坏死细胞碎片后的imDCs表达共刺激分 子CIM0、CD80、CD86。当TGFDl中和抗体和早期凋亡 T淋巴细胞同加入 imDCs，在表达 MHC—II、CIM0、CD80、 CD86，分泌IL一12p70，刺激处女T淋巴细胞增殖等方面和吞噬坏死T淋巴细的DCs相比无显著差异。结论：早 期凋亡 T淋巴细胞通过释放免疫抑制性细胞因子TGFD，，诱导imDCs呈现出耐受性DCs(TolDCs)的免疫表型及生 物学特征，从而发挥抑制性免疫调节作用。 [关键词】 细胞凋亡；T淋巴细胞；树突细胞 [中图分类号】 R363 [文献标识码】 A EarlyapoptoticT lymphocytesinduceDCsfrom bonemarrow totolero· genicDCs ZHANGWen—jin，ZHENGShu—sen，XIEHai—yang (DepartmentofHepatobiliaryandPancreaticSurgery，TheFirst够 f池 dHospital，ZhejiangUniversitySchoolofMedciine； Keyl_ztboratoryofCombinedMulti—organTransplantation，MinistryofPublciHealth，Hangzhou310003，China．E—mail： ryyykjk@163．corn) [ABSTRACT] AIM：TostudytheimmunosuppressiveeffectsofearlyapoptoticTlymphocytes．METHODS：Era- lyapoptoticspleenTcellswereinducedbyultravioletirradiationfor5min．Afterirradiation．spleenTceHsweieincubated at37℃ with5％ CO2ofr2handhtuseralyapoptoticTlymphocyteswereobtained．Threetofourfreezehtaw cyclesresul’ 吲 indisruptionofhtespleenTceusintofragments．im