载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化早期血管外膜成纤维细胞增殖活性增强.pdfVIP

理生理杂志 ChineseJournalofP Y gy ! (2；堕堕二 · l5O3 · [文章编号】 1000—4718(2010108—1503—06 载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化早期血管外膜 成纤维细胞增殖活性增强球 徐 芳 ， 刘 颖 ， 石 磊 ， 蔡虹静 ， 王蔚琛 ， 胡维诚 (滨州医学院 病理生理学教研室 ，附属医院，山东 滨州256603) [摘 要] 目的：探讨动脉外膜成纤维细胞增殖与早期动脉粥样硬化病灶形成的关系。方法：选择6周龄载 脂蛋白E基因敲除[apoE(一／一)]小鼠和野生型C57BL／6小鼠，高脂喂养2,4和 10周后 ，在各个时点处死动物前 24h经腹腔注射5一溴一2一脱氧尿嘧啶(BrdU)，后选取升主动脉制备连续切片，通过HE染色观察组织形态学的 变化，用免疫组化方法观察不同时点血管外膜及内膜BrdU的表达变化。体外培养高脂喂养2周的apoE(一／一)小 鼠和C57BL／6小鼠动脉外膜成纤维细胞，通过BrdU掺入法测定细胞增殖活性 ，流式细胞术测定细胞周期。结果： 体内实验发现apoE(一／一)小鼠高脂喂养2周后，在无可见内膜病灶形成之前 ，首先在主动脉外膜发现BrdU标记 的阳性细胞，之后才在损伤内膜观察到 Brdu标记细胞。而C57BL／6小鼠在任何时点都未检测到 BrdU标记的细 胞。体外实验观察到apoE(一／一)小鼠血管外膜成纤维细胞 BrdU标记 的细胞数显著多于 C57BL／6小鼠(P 0．O1)，apoE(一／一)小鼠血管外膜成纤维细胞s期及 G／M期所 占百分 比明显高于对照组(P0．05)。结论：血 管外膜成纤维细胞增殖可能参与早期动脉粥样硬化病灶形成。 [关键词] 成纤维细胞；外膜 ；细胞增殖；动脉粥样硬化；载脂蛋白E基因敲除小鼠 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2010．010 Increaseinproliferationofadventitialfibroblastsatearlystageofathero- sclerosisinapoE(一／一)mice XUFang，LIUYing，SHILei，CAIHong—jing，WANGWei—chen ，HUWei— cheng (DepartmentofPathophysiology，AJ~liatedHo~itd，BinzhouMedwalUniversity，Binzhou256603，China．E—mail：hu- weicheng@sdu．edu．clz) [ABSTRACT] AIM：Tostudytherelationshipbetweentheproliferationofadventitialfibroblastsandtheearlyfor- mationofahteroscleroticlesion．METHODS：ApoE(一／一)miceandwild—typeC57BL／6blackmice(6一weekold) wereusedinthisexperiment．5一Bromo～2一deoxyuridine(BrdU)wasadministered24hbeforehteanimalsweresacri- ricedattimepointsof0，2，4or10weeksafterhyperlipidicdiet，respectively．Theascendingaortawasremovedforserial sectioning．Themorph0l0 calchangesoftheaortictissueswereobservedundermicroscopewiht HE staining．Somesec— tionsoftheaortawereusedtoobservetheBrdU labelingintheadventitiaandintimaatdifferenttimepointsbythemethod