孕酮对氧糖剥夺损伤的PC12细胞的保护作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(2)：269—273 · 269 · [文章编号] 1000—4718(2012)02—0269—05 术 孕酮对氧糖剥夺损伤 的PC12细胞的保护作用 侯志慧， 王国红， 吴春平， 李东亮 (新乡医学院生理学与神经生物学教研室，河南 新乡453003) [摘 要] 目的：观察孕酮 (PROG)对氧糖剥夺 (OGD)PC12细胞活力及葡萄糖转运蛋 白3(GLUT3)表达的 影响，在培养细胞证明孕酮抗缺氧缺血损伤的神经保护作用。方法：神经生长因子诱导分化良好的PC12细胞，随 机分为3组 ：(1)正常对照组 ：常规培养 ，不进行OGD处理；(2)OGD组 ：无糖培养基 、低氧环境(95％N：和5％CO 持续通气)进行 OGD30min处理，然后复氧复糖培养24h；(3)PROG+OGD组：培养液含终浓度为 10nmol／L孕 酮，余同OGD组。wsT一8法检测各组PC12细胞的活力；检测培养液 中乳酸脱氢酶(LDH)的活性，判断细胞损伤 的程度；反转录一聚合酶链反应 (RT—PCR)检测PC12细胞 GLUT1mRNA和GLUT3mRNA表达；Westernblotting 法检测PC12细胞 GLUT3蛋白表达。结果 ：孕酮可以减轻 OGD引起的PC12细胞肿胀，降低 LDH漏出，减轻细胞 损伤 ，显著增加 OGD组 PC12细胞的活力(P0．01)。RT—PCR显示 PROG +OGD组 GLUT3mRNA的表达明显 高于OGD组(P0．05)，Westernblotting显示 PROG +OGD组 GLUT3蛋 白的表达显著高于 OGD组 (P0．叭)。 结论 ：孕酮对体外培养OGD损伤的PC12细胞具有保护作用 ，其机制可能与上调 GLUT3蛋白的表达有关。 [关键词] 孕酮；PC12细胞；神经元；氧糖剥夺 ；葡萄糖转运蛋白质 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．02．015 ProtectiveeffectofprogesteroneonPC12cellsinjuredbyoxygen——glu-- cosedeprivation HOU Zhi—hui，WANG Guo—hong，WU Chun—ping，LIDong—liang (DepartmentofPhysiologyandN~urobiology，XinxiangMedicalUniversity，Xinxiang453003，China．E—mail：xyldt8@ 126．con) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectsofprogesteroneonthecellviabilityandexpressionofglucosetrans— portertype3(GLUT3)inPC12cellsinjuredbyoxygen～glucosedeprivation(OGD)inattempttoprovetheneuroprotec— tionofprogesterone(PROG)againstthehypoxic—ischemicinjuryinculturedcellsinvitro．METHODS：Well—differen- tiatedPCI2cellsinducedbynervegrowthfactorwererandomlydividedinto3groups．Innormalgroup，thecellswerecul— turedwithoutOGDtreatment．InOGD group，theculturemedium wasreplacedby uc0se—freemedium a