转染Kv1．5基因抑制人气道平滑肌细胞的增殖.pdfVIP

维普资讯 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 20o7，23(1)：81—85 · 81 · 【文章编号】 1000—4718(2007)01-0081-05 转染 Kv1．5基 因抑制人气道平滑肌细胞的增殖 赵丽敏 ， 徐永健 ， 熊盛道 ， 张珍祥 (’河南省人民医院呼吸科，河南 郑州 450003；华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸科，湖北 武汉430030) 【摘 要】 目的：转染 Kv1．5基因对人气道平滑肌细胞(HASMCs)增殖及凋亡的影响。方法：通过脂质体介 导瞬时转染Kv1．5基因于培养的HASMCs中，以转染空载体 pRe／CMV的细胞及未转染质粒的细胞为对照；用 Westernblotting检测平滑肌细胞Kv1．5蛋白表达；用荧光光度法检测HASMCs胞内钙浓度；用流式细胞术观察细胞 周期；用 MTr法检测HASMCs增殖及 DNA末端转移酶介导的原位缺 口末端标记技术 (TUNEL)检测细胞的凋亡。 结果：(1)转染质粒组Kv1．5蛋白质的表达明显高于未转染组及空载体转染组(P0．01)；(2)转染质粒组细胞 胞内钙浓度明显低于未转染组及空载体转染组(P0．05)，且其细胞周期中的GolG。期细胞 比例明显高于、细胞 增殖率显著低于未转染组及空载体转染组(P0．01)；同时，转染质粒组细胞的凋亡率明显高于未转染组及空载体 转染组 (P0．01)。结论：转染Kv1．5基因能抑制HASMCs的增殖、促进其凋亡，为进一步探讨哮喘气道重塑的机 制及其治疗提供实验依据。 【关键词】 基因转染；气道平滑肌细胞；细胞增殖；细胞凋亡 【中图分类号】 R363 【文献标识码】 A Transfection ofhuman Kv1．5 gene inhibitstheproliferation ofhuman airwaysmooth musdecells ZHAOLi—min，XUYong—jian，XIONGSheng—dao2，ZHANGZhen—xiang (D‘epartmentofRespiratoryMedicine，tlenanProvincial §Hospital，Zhengzhou450003，Ch／na；DepartmentofRe- spriatoryMedicine，To,~jiHospital，To,~jiMedicalCollege，HuazhoagUnivers~ of ScienceandTechnology，Wuhan 430030，Chn／a．E—ma／／：y~u@驰．咖姒edu．cn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectofhumanKv1．5genetransfectiononhteprolfierationnadapoptosis inhumanairwaysmoohtmu~lecells(HASMCs)．METHODS：Kv1．5geneWfl8transientlytransfcetedintoHASMCswith Lipe fectamine2000nadhtelevelofKv1．5proteinWSSobservedbyWestern blotting．Ca2 concentrationinHASMCswas investiagtde byfluorecsentqunatitationusingfluorospeetrophotometer．Flow—eytometry．MTr methodnad TUNEL were usedtodetcethteeffcetsofKv1．5genetransfcetiononproliferationnadapopotsisinHASMCs．RESULTS：(I)Western blottingshowde htattransfcetionofhumanKv1．5plasmidsignificnatlyincreasde