心肌细胞结缔组织生长因子的表达及TGF-β1对其表达的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(6)：1060—1064 [文章编号] 1000—4718(2008)06—1060—05 心肌细胞结缔组织生长因子的表达及 TGF一 对其表达的影响：l= 郭 敏 ， 郎明健。， 曾秋棠 ， 杨汉东 ， 闵新文 (华中科技大学同济医学院协和医院心内科，湖北 武汉430022；郧阳医学院附属东风医院心内科，湖北 十堰442008) [摘 要】 目的：研究纯化的心肌细胞中结缔组织生长因子(CTGF)基因及蛋白的表达，并探讨转化生长因 子 p。(TGF—B。)对其表达的影响。方法：分离培养乳 鼠心肌细胞 ，48h后用流式分选方法 (FACS)分选纯化心肌 细胞，纯化的心肌细胞继续培养48h。分为对照组(空白纯化心肌细胞组)和TGF—B。刺激组，用RT—PCR方法测 定两组细胞中TGF—p、CTGF、纤维连接蛋白(FN)mRNA的含量，用Westernblotting法检测两组细胞胞浆蛋白中 CTGF、FN含量。结果：心肌细胞中有较低水平的CTGF表达，在予以TGF—B．刺激后细胞内CTGFmRNA与蛋白 含量分别提高2．49倍(P0．01)和3．63倍 (P0．01)，FNmRNA与蛋白含量分别提高1倍 (P0．01)和4．18倍 (P0．01)，而TGF—B。mRNA水平减少 34％(P0．01)。结论：纯化的心肌细胞有 CTGF的基础表达，并且 TGF — B．可以明显上调其表达，提示心肌细胞主动参与了心肌纤维化过程。 [关键词] 心肌细胞 ；心肌纤维化；结缔组织生长因子；转化生长因子B [中图分类号】 R363 [文献标识码] A Expressionofconnectivetissuegrowth factorin thecardiomyocytesand theeffectofTGF— onitssecretion GUOMin，LANGMing—jian，ZENGQiu—tang，YANGHan—dong，MINXin一 2 w en (DepartmentofCardiology，TheUnoinHospital，Ton~iMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnoloyg， Wuhan430022，China； Department of Cardoiolyg，DongfengGeneralHosptial，YunyangMedcialColelge，Sh@an 442008，China．E—mail：zengqiutang@163．corn) [ABSTRACT] AIM ：ToinvestigatethemRNAandproteinexpressionsofconnectivetissuegrowthfactor(CTGF) inthecardiomyocytes，andtoevaluatetheeffectoftrnasforminggrowthfactor—pl(TGF—p1)onit．METHODS：Ven- tricularcardiomyocyteswereisolatedfrom neonatalratsna dcultured for48h．then thecardiomyocytesweresortedby menasoffluorescence—activatedcellsortingfFACS)．ThesortedceHswerecontinuouslyculturedofr48hnaddividedin- totwogroups：thecontrolgroupnadtheTGF—Blstimulationgroup．ThemRNAexpressionsofCTGF，TGF—pl，andfi-