表达gpt与EGFP基因重组山羊痘病毒的构建与鉴定_南文金.pdfVIP

中国动物检疫 年第 卷第 期 －31－ 2009 26 2 表达gpt 和EGFP 基因重组山羊痘病毒 的构建和鉴定 1,2 1 1 1 1 南文金 王清华 吴晓东 赵永刚 王志亮 ， ， ， ， (1. 中国动物卫生与流行病学中心 山东青岛 266032 2.扬州大学兽医学院 江苏扬州 225009) ， ； ， 摘要 在包含山羊痘病毒 Goatpox virus,GPV 疫苗株复制非必需区TK(Thymidine kinase ) 基因和背靠背启动 ： （ ） 子的质粒PtkPP 的两个启动子下游插入EGFP 增强绿色荧光蛋白 基因 构建了质粒PtkPegfpP 和PtkPPegfp 这两 （ ） ， ， 个重组质粒分别瞬时转染 细胞 验证了启动子 和 能成功表达 基因后 在 启动子 的下 LT P11 P7.5 EGFP PtkPP P11 ， ， 游插入gpt 黄嘌呤鸟嘌呤磷酸转移酶 基因和EGFP 基因 构建重组质粒PtkPgpt-egfpP 该重组质粒和GPV 同源重 （ ） ， ， 组获得重组病毒rGPV-PtkPgpt-egfpP 利用MPA 霉芬酸 阻断核酸代谢途径筛选到稳定表达EGFP 基因的重组 ， （ ） GPV 。 为进一步开展GPV 活载体疫苗的研究提供了技术平台。 关键词 重组山羊痘病毒 TK 基因 gpt 基因 EGFP 基因 ： ； ； ； 中图分类号 S852.654 文献标识码 A 文章编号 ： ： ： （ ） 1005－944X 2009 02－0031－04 Construction and identification of recombinant goatpox virus expressing gpt and EGFP