金贝乳康片对乳腺癌癌前病变肝郁肾虚模型的干预研究.pdfVIP

·410· 乳腺癌癌前病交篇 Ru Pill； Kang words‘‘WenyangJieyu’method；liver deficiencymodel；Kimbe Key depressionkidney lesions breast precancerous 随着社会、生活节奏的加快，办公室白领及高学历女性患者乳腺疾病的发病率逐年升高，我们临床 观察发现，长期处于空调等人工环境中且工作压力大的乳腺增生病和乳腺癌癌前疾病的患者，临床多辨 证为“肝郁肾虚”证。 为了研究中医药对此类型患者的治疗作用，本课题采用慢性轻度不可预计应激及冷水刺激应激模 型，高度模拟该类患者在日常工作生活及环境中所受到的负性应激，将其与乳腺癌癌前病变模型相结合， 建立肝郁肾虚模型，探索适合中医药研究的病证结合模型；并以温阳解郁法代表方金贝乳康片作为干预 因素，从病理及激素水平变化等方面探讨金贝乳康片对乳腺癌癌前病变大鼠的抑制作用。 l材料与方法 1．1实验动物 动物中心，在中国中医科学院中药研究所动物实验中心饲养。饲养条件为光照8am．8pm，室温25℃-28 ℃，相对湿度45％．50％，半屏蔽环境，饲料及饮水均严格消毒。 1．2试剂与药物 CORT试剂盒、E2试剂盒、P试剂盒均由北京优博奥生物技术有限公司提供。 DMBA由美国Sigma公司提供；金贝乳康片由北京因科瑞斯医药科技有限公司惠赠。 1．3分组、模型制备及给药 1．3．1分组 组15只，模型组20只，金贝乳康片组20只。 1．3．2乳腺癌癌前病变模型制备 除正常组外，其余实验大鼠给予溶有DMBA的芝麻油0．19／kg灌胃，然后开始进行常规饲养9周。 实验第7周开始，模型组及金贝乳康片组大鼠给予慢性轻度不可预计应激及冷水刺激应激。整套多 在21d完成，连续进行，每天1种次。 1．3．3给药 于第10周开始，金贝乳康片组给予金贝乳康片水溶剂1．59／kg连续灌胃1月，其余组给予蒸馏水 10ml／kg连续灌胃1月。 1．4取材 实验结束，腹腔注射麻醉后，大鼠于8am到10am问腹腔取血，取上清．70C保存备用；无菌条件下 取大鼠胸部第2对乳腺及其周围皮肤、皮下组织，标本用4％的多聚甲醛固定液固定备用。 1．5指标观察 1．5．1行为学观察 末次应激后24h内，各组大鼠观察毛色、直立攀笼次数、情绪反应、对刺激敏感程度、活动度、饮 食饮水量等的变化情况。 1．5．2肉眼可见肿瘤发生率计算 实验第7周开始，每周观察一次大鼠肉眼可见肿瘤发生情况，详细记录每组肉眼可见肿瘤大鼠数， 并记录单发、多发肿瘤数目。实验结束，计算各组肉眼可见肿瘤发生率。 1．5．3指标检测 织病理变化。乳腺病理诊断标准参考(WHO肿瘤分类》，见表1．1。 乳腺癌癌前病变篇 ·411· 表1．1三级非典型增生与单纯性增生及原位癌的鉴别要点 1．6统计学方法 用SAS9．0统计软件进行分析。结果以均值和标准差(x±，)表示对于呈正态分布和方差齐的计量资 料采用多样本ANOVA方差分析、LSD检验，对于非正态分布和方差不齐的资料采用welch近似检验。 计数资料采用z7检验。 2结果 2．1各组大鼠生物表征变化比较 造模结束，模型组及金贝乳康片组大鼠出现较为明显的异常生物表征：皮毛松弛，暗淡无光、蜷缩 少动，扎堆眯眼，倦怠淡漠，对刺激敏感度降低，反应迟缓，饮食水量减少，舌有瘀斑等。正常组及对 照组大鼠生物表征未见异常变化。见表2．1。 表2-1大鼠生物表征变化 2．2各组大鼠肉眼可见肿瘤发生情况比较 眼可见肿瘤发生率均有显著差异(P．0．05)，金92-孚L康片组与正常组相比无统计学意义。见表2．2。 乳腺癌癌前病变篇 表2-2大鼠内服可见肿窟发生情