哺乳动物卵母细胞减数分裂成熟恢复机理研究进展.pdfVIP

实验室研究 随着卵母细胞在体外培养体系的进一步完善和成熟人们逐渐了解到卵母细胞成熟分裂恢复 是多因素多级联控制模式。虽然对诱导卵母细胞成熟分裂囝素得到了部分解释，但是仍然有很多 不明机理有待于深入研究。 2．1促性腺激素关于FSH和LH对卵母细胞成熟分裂恢复的精确机制还不清楚。一些实验 结果也表明，仅用于FsH也能导致培养卵泡中卵母细胞的生发泡发生破裂，而且F§H也能促进 体外培养的被卵丘细胞包裹的卵母细胞的成熟，但是LH却不能。这些结果说明，F’sH和LH对卵 母细胞的调控机制不是唯一的，它们可能扮演中同等重要的角色。目前认为FSH充当促进卵母细 胞生长的角色．而LH主要诱导卵母细胞的减数分裂恢复。根据已有的研究资料表明，LH诱导卵 母细胞恢复减数分裂可能通过以下途径：一是诱导卵丘的扩展使得颗粒细胞与卵母细胞的连接 中断，使抑制卵母细胞减数分裂的抑制物质(例如cAMP)向卵母细胞的抑制作用输入中断，恢复 了减数分裂。研究表明，在腔前或小腔卵泡FSH的受体表达最高。FSH能诱导颗粒细胞分泌 oAMP。通过体细胞之间的连接蛋白Cx43输送到卵母细胞，从而使得cAMP在卵母细胞中维持较 高水平，抑制卵母细胞减数分裂并促进卵母细胞的生长。FSH受体在大卵沲中或体外培养的卵丘 细胞复合体(cumulus-oocyle 是FSH能够诱导LH受体的表达。促进孕酮表达，使得卵母细胞的减数分裂恢复。在LH的作用 (磷酸激酶A)浓度的下降。而PKA底物去磷酸化，导致了减数分裂的恢复。二是诱导卵丘细胞产 fluid 生减数分裂抑制的阳性刺激园子。例如卵泡液中减数分裂激活物质(Folliularactivadng 数分裂。另一种阳性刺激因子。即Ca2+能够导致卵母细胞减数分裂的恢复。在绵羊上，LH作用于 膜细胞和颗粒细胞上的受体，能够刺激这些细胞中的Ca2+水平升高，通过细胞之间的间隙连接， 2．2促性腺激素释放激素下丘腑分泌的GnRH能作用于垂体，使之释放FSH和LH．LH能通 过以上方式促进卵母细胞成熟分裂。 生长因子(TGF)等。GH、EGF，IGF的表面受体是跨膜酷氨酸性受体，受体酪氨酸激酶为跨膜，当信 号分子与受体结合时．两个受体相互靠拢，形成受体分子二聚体，分子的激酶活性被激活，彼此相 互催化发生磷酸化。磷酸化的受体酪氨酸激酶(RPTK)为胞内的许多信号传递蛋白提供了结合部 位，结台成复合物质。这种信号传递复台物通过几条途径传递信号，例如：RPTK—Ras—MAPK信号 途径引起细胞生长、增殖、发育和分化。TGF作用是通过丝氨酸／苏氨酸激酶性受体来实现的，能 调节各种细胞的增殖功能。在研究中发现，IGF—l能够显著地促进卵丘颗粒细胞分泌雄烯二酮， 其能促进颗粒细胞的生长和发育，并且IGF能明显地影响卵母细胞的成熟过程。但是lGF．1并不 能引起颗粒细胞的扩展。EGF能显著地提高卵母组胞的核成熟，IGF—l能和EGF对卵母细胞核成 熟产生协同效应．这点已经在牛、猪、免等动物上得到证明。 2．4成熟促进周子从M期体细胞以及iE在进行瘟数分裂的卵母细胞中提取一种刺激 or factor,MPF．也叫作M期的 GVBD的物质称之为成熟促进园子(Maturatonmetaphase—promoting B 促进因子。在对两栖类动物如爪蟾、蝾螈卵母细胞研究中发现，MPF由两种蛋白组成．即cyclin B随细胞周期 (周期蛋白B)和P34cdc2，以无活性前体的形式存在于未成熟的卵母细胞中，cyclin 的变化而周期性地产生。它在分裂间期产生并职聚、超过激活的阈值、细胞分化后期降解，MPF失 一70一 实验室研究 而且还可激活cdc25酪氨酸磷酸酶，这种酶与MPF的活性有关。对于卵母细胞而言．由G2期向 化，染色体击致密，核膜破裂，从而发生GVBD，导致卵母细胞成熟。在爪蟾中，MPF是一下被激活 的，但是在蝾螈中，MPF的激活是渐进式样的被撤活。MPF无论在两栖