高效液相色谱法测定骨形成蛋白长效微球含量.pdfVIP

维普资讯 中国药师 2008年第11卷第3期 ChinaPharmacist2008，Vo1．11No．3 高效液相色谱法测定骨形成蛋 白长效微球的含量 符旭东 张盂佑 韩亮 (广州军区武汉总医院药剂科 武汉430070) 摘 要 目的：建立测定骨形成蛋白长效微球 中药物含量的方法。方法 ：以乳酸-羟基乙酸共聚物为材料制备微球，用HPLC 法测定制剂的含量。结果：骨形成蛋 白在1．5—75．0Ixg·ml 的浓度范围内，峰面积与浓度呈 良好的线性关系，方法的平均 回收率为98、5％，RSD为0．5％。结论：该方法操作简单、可靠，可用于测定乳酸-羟基 乙酸共聚物微球中的药物的含量。 关键词 骨形成蛋白；乳酸 ·羟基 乙酸共聚物；微球 ；HPLC；含量测定 中图分类号：R927．2 文献标识码：A 文章编号：1008-049X(2008)03-0277-02 Determination theContentofBoneM orphogeneticProtein——loadedLong-·actingM icrospheresbyHPLC FuXudong，ZhangMengyou，HanLiang(WuhanGeneralHospitalofGuanzhouCommand，Wuhan430030，China) ABSTRACT Objective：Toestablishamethodfordeterminationthecontentofbonemorphogeneticprotein—loadedmicrospheres． Method：Poly(1actic-COg·lycolicacid)(PLGA)wasusedtofabricatethemicrospheres．HPLCwasusedtodeterminedrugcontentin microspheres．Result：ThelinearrangeofBMP was1、5—75 Ixg·ml～．theaveragerecoverywas98．8％ ，RSD was0．9％ ．Conclu- sion：Themethodissimple，accurate、Itcanbeusedtodetemr inetheBMP inPLGA microspheres． KEYWORDS Bonemorphogeneticprotein；Poly(1actic—co,glycolicacid)；Microsphere；HPLC 骨形成蛋 白(bonemorphogeneticprotein，BMP)作为 目 2．2 样品溶液 的制备 前发现的唯一能在体内诱导骨与软骨的细胞因子，在外科修 2．2，1 对照品溶液的制备 精密称取 rhBMP一2适量，以水 复领域中具有广阔的应用前景。但 由于药物在体 内容易失 为溶剂 ，制成500 g·ml 的对照品贮备液。再精密量取rh- 活一定程度上限制其发展 ，寻找适宜的载药系统递送 BMP BMP-2贮备液适量，以水为溶剂 ，制成 10 g·ml 的溶液作 一 直是BMP的研究热点之一。笔者以生物可降解聚合物聚 为对照品溶液。 乳酸一羟基乙酸共聚物 (PLGA)为材料 ，采用乳化溶剂挥发法 2．2．2 供试 品溶液的制备 精密称取研磨后 的rhBMP．2 制备 BMP长效微球，以期提高药物在体内的稳定性，延长药 微球 10mg，置于5ml量瓶中，加水适量，冰浴中超声20s，稀 物作用时间。BMP微粒给药系统含量测定的方法国内采用 释至刻度，10000r·rain 离心10min，经0．45 m微孑L滤膜 的是紫外分光光度法 (uV)¨，，这种方法检测的专属性较 过滤后得到供试品溶液。 差，而且 uV法单次检测所需要的样品量多，BMP价格又非 2，2．3 空 白样品溶液的制备 称取PLGA约 10mg，按照 常昂贵。为了克服上述缺点，本文建立了高效液相色谱法测 供试品溶液的制备方法制备空白样品溶液。 定BMP长效微球的含量 ，现报道如下。