水稻根部蛋白质组样品制备的方法的研究.pdfVIP

河南农业科学 ，2012，41(10)：25—27 JournalofHenanAgriculturalSciences 水稻根部蛋 白质组样 品制备的方法研究 袁丽环 (山西师范大学 生命科学学院，山西 临汾 041004) 摘要 ：为了选择 适用于水稻根部蛋 白质组分析的样品制备方法，以水稻苗期 幼嫩根 尖为材料 ，采 用 TCA／丙酮沉淀法、Tris法、尿素 ／硫脲法对水稻根部总蛋 白质进行提取 并比对，通过 Bradford法、 SDS—PAGE 电泳技术对蛋 白质含量和种类进行分析 。结果显示 ，Tris法提取 出的水稻根部蛋 白 质含量和种类明显少于其他 2种方法；尿素 ／硫脲法和 TCA／丙酮沉淀法提取的蛋 白质种类和含量 都较 多，其中，尿素 ／硫脲法的蛋 白质 图谱 中蛋 白条带 多，染色深而且很清晰，尤其适用于较低分子 量蛋 白质 的提取 ，TCA／丙酮沉淀法则适于高分子量蛋 白质 的提取 。因此 ，进行水稻根部总蛋 白质 组分析时，可选用尿素 ／硫脲法。 关键词 ：水稻 ；根部蛋 白质 ；提取方法 ；SDS—PAGE 中图分类号 ：Q503 S511 文献标识码：A 文章编号 ：1004—3268(2012)10—0025—03 A StudyonSamplePreparationM ethodofRiceRootProteome YUAN Li—huan (SchoolofLifeScience，ShanxiNormalUniversity，Linfen041004，China) Abstract：Inordertodevelopthesamplepreparationmethodsforricerootproteomeanalysis，the TCA／acetoneprecipitationmethod，directextractionmethodandurea／thioureamethodwereused toextractthericerootprotein，andtheproteincontentsandtypesofsampleswereanalyzedusing BradfordmethodandSDS—PAGE electrophoresis．Theresultsindicatedthatthedirectextraction methodwastheworstamongthethreemethods，givingtheleastproteinbandsandproteincon— tent；theTCA／acetoneprecipitationmethodandtheurea／thioureamethodweretheoptimalmeth— ods，both producing moreprotein bands，whilethelattershowed moreprotein typesand more clearbands，especiallyforthelow—molecularweightproteins，whiletheTCA／acetoneprecipitation methodwasmoresuitableforthepreparationofhighmolecularweightproteins．Itwassuggested thatdifferentmethodshaddifferentspecialtiesandtheurea／thioureamethodwastheoptimal m ethodfortotalproteinextractionofriceroots． Keywords：rice；rootprotein；extractionmethod；SDS—PAGE 从组织和细胞中提取蛋白质是蛋白质组研究 中 脲法 3种提取方法进行 比较分析 ，旨在筛选出经济 的关键 。植物组织因含有大量蛋白酶和次级代谢产 有效的适用于 SDS—PAGE法和双向