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24 2 CHINA BIOTECHNOLOGY 2004 2
GGPP *
**
肖明贵 余龙江 刘 智 程 华 向 福 周智德
( 430074)
从5 年生曼地亚红豆杉( Taxus media) 的当年生新鲜枝叶中提取分离出mRNA, 然后根据已
知植物的 牛儿 牛儿 焦磷酸合成酶 因( GGPPS 因) DNA 序列保守区设计特异简并引
物RT-PCR 获得了一条大小约600bp 的扩增谱带, 回收该特异谱带并进行TA 克隆, 蓝白斑筛
选, 得到若干阳性克隆经过质粒大小比较和PCR 验证后, 进行序列测定和同源性比较发现
该序列属于 GGPP 合成酶的片断, 与 Taxus canadensis ( AAD 1601811) 和 Abies grandis ( AAL
1761412) 的GGPP 合成酶相应区段的氨 酸序列 一致性为98%和86% 蛋白质序列分析发现该
序列含有一个特征的异戊二烯合成酶保守的结构域进化树分析表明, 曼地亚红豆杉GGPPS 在
进化上位于植物类, 靠近古细菌类曼地亚红豆杉GGPPS 因的克隆为研究红豆杉生产紫杉醇
的分子机理和转 因植株的构建奠定了良好的 础
曼地亚红豆杉 牛儿 牛儿 焦磷酸合成酶 RT-PCR
,
GGPP
, RhoPRac, Rap Rab
,
[ 5]
,
, ( ) ,
,
,
[ 1] [ 6]
( geran hlgeran l
p rophosphate, GGPP) GGPPS cDNA ,
, GenBank , ,
[ 2] CLUSTX ,
GGPP
taxa-4( 5) , 11 , GGPPS cDNA( GenBank
( 12)-diene, , Accession No.AF081514) , primer premier
[ 3]
GGPP 5 , ,
( farnes l p rophosphate, FPP) GGPPS ,
( isopenten l diphosphate) GGPPS ,
GGPP, GGPP GGPP ,
,
[ 4]
,
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