米根霉F1-ATPase弱化株增加L-乳酸发酵强度.pdfVIP

根霉F -ATPase 弱化株增加L-乳酸发酵强度1 1 姜绍通，罗水忠，郑志 合肥工业大学生物与食品工程学院，合肥 (230009 ） E-mail:j iangshaotong@ 要： 文采用同步辐射软X射线Nk诱变米根霉，获得一株新霉素抗性突变株NA-2，该菌株 F -ATPase活性降低86.82%，胞内ATP含量下降18.99%，最终菌体浓度为出发菌株的79.22%， 1 发酵周期缩短了12h，葡萄糖平均消耗速度和L-乳酸生产强度分别高出25.17%和32.57%，平 均葡萄糖消耗比速q 、L-乳酸生成比速q 和细胞比生长速率分别提高86.42%、128.13%和 s p 60.0%，但胞内能荷变化不明显。进一步研究发现，突变株糖酵解途径中关键酶磷酸果糖激 酶、丙酮酸激酶和磷酸甘油醛激酶的活性提高了58.34%，23.53%和11.29%，乙醇脱氢酶活性 降低了32.11%，乳酸脱氢酶活性提高了42.27%。结果表明降低米根霉F -ATPase活性有效地 1 提高了糖酵解关键酶活性而加速葡萄糖代谢、提高了L-乳酸生产强度。 关键词：米根霉，F -ATPase，糖酵解，L-乳酸，新霉素抗性 1 中图分类号：Q935 1 引言 L-乳酸是一种重要的天然有机酸，在食品、医药、环保领域中具有良好的应用前景。发 酵法是大规模生产高光学纯L-乳酸的主要方法。米根霉(Rhizopus oryzae)由于具有好氧发 酵、营养要求粗放、发酵产物L-乳酸纯度高、易于分离等特点，而成为目前制备高光学纯度 [1-2] L- 乳酸的主要生产菌种 。但米根霉发酵生产L- 乳酸存在发酵周期长，糖转化率低等缺 [3-6] 点，限制了其在实际生产中的应用。国内外许多学者对米根霉的菌种改良做了大量研究 ， 取得一定可喜的成效，但这些研究主要是在大量筛选工作的基础上，结合发酵条件的优化而 获得高产突变株，因此存在突变菌株易退化、发酵参数不稳定、生产强度低等缺陷。 [7] 米根霉产L-乳酸代谢网络 表明：葡萄糖进人细胞内，通过糖酵解途径(EMP )生成丙酮 酸，丙酮酸是关键代谢控制点之一，丙酮酸在细胞内主要有4种去向，其中一种即通过L-乳 Ext-