马立克氏病病毒pp38基因上游的一个双向启动子的研究.pdfVIP

卷 期 !! 微 生 物 学 报 $% ’!! ,% ’ 年 月 ##! ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ()*+ ##! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 马立克氏病病毒!!# 基因上游的一个双向启动子研究 丁家波 崔治中 孙淑红 姜世金 （山东农业大学动物科技学院 泰安 .5#52） 摘 要：马立克氏病病毒（ ） 基因上游是病毒基因组 复制原点。在其两侧均含有启动子 、 HI$ ))-2 I,( 0(0(4F%8 J((04F%8 等特征性的保守基元，推测是一个天然的双向启动子。为了在体外验证其双向启动活性，本研究以HI4 $))-2 为报告基因，并将其KL6 插入到)MJ52 中，构建了)MJ4))-2 质粒。将包含该启动子完整区域的.29F) 序列分 别以正反两个方向克隆进 质粒中 报告基因的上游，获得的重组质粒 O 和 * 。将所获 )MJ4))-2 ))-2 )N*% ))-2 )N*% ))-2 得的重组质粒分别转染鸡胚成纤维细胞（ ），通过间接免疫荧光试验检测 基因的表达以验证该启动子的双 J:6 ))-2 向启动活性。结果表明，马立克氏病病毒复制原点区的启动子无论以何种方向插入)MJ4))-2 质粒中，在转染细胞 内能检测到 基因的表达， 后能获得高效和持续的表达。逐渐缩小该启动子的范围，最终在 时，仍 !G ))-2 !2G -#F) 能检测到两个方向较强的启动活性。 关键词：马立克氏病病毒， 基因，双向启动子 ))-2 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） P9-- ( ###543#9 ##! #4#534#/ 马立克氏病病毒（ ’ ， ） 光强度，确定了与该启动子活性相关的碱基范围。 !#$% ’($$ )(#* HI$ 是一种细胞结合型疱疹病毒，对养禽业造成了巨大 ［ ］ $ 材料和方法 的损失5 Q - 。随着对HI$ 基因组结构的深入研究， ［ ］ 与 ! Q 9 材料和试剂 HI$ 致肿瘤相关的基因相继被发现 。在以 $% $ 基因组 复制原点的两侧约 的区域 、 、 连接酶、 、 等 HI$ I,( -/#F) )MJ52 NJL W+X 0! I,( Y4D7 VN0Z 内，均含有 、 、 和 反向 均购于大连宝生物工