酿酒酵母发酵产乙醇过程中细胞生长和乙醇生产关系的研究.pdfVIP

酿酒酵母发酵产乙醇过程中细胞生长与乙醇生产关系的研 究 王智明，王灏，郭养浩，孟春* 福州大学生物科学与工程学院生物工程系 福州 福建 350002 E-mail: mengchun@ 摘要：利用连续流搅拌槽式反应器（CSTR ）体系，结合秋水仙素抑制细胞生长实验，对不同稀释率 下酿酒酵母乙醇发酵过程进行研究，实验表明乙醇产生速率与细胞生长密切相关。高细胞密度 乙醇发酵可以提高乙醇发酵水平和葡萄糖利用率。高细胞密度乙醇发酵实验证实，在发酵到 44h -1 -1 -1 时，乙醇浓度达到 160gl ；69h 时，其细胞干重为 85gl ，乙醇浓度高达 167.121gl ，葡萄糖的 利用率达到了 94.23%. 关键词：酿酒酵母；乙醇；发酵；CSTR ；秋水仙素；比乙醇产率 中图分类号：TK16 文献标识码：A 引言 始于 20 世纪70 年代的“能源危机”使人们开始意识到利用可再生资源(如粮食或植物纤维)发酵 生产酒精，作为生物能源来代替或部分代替汽油的重要性和紧迫性 [1～3] 。利用发酵法生产酒精，获得 高酒精含量一直是大家所追求的目标。 酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiac)是目前用于工业化酒精生产的唯一微生物菌株。乙醇生产与酵 [4] [5] 母细胞的生长代谢过程密切相关 。菌体在发酵罐内的自然生长繁殖过程符合Verhulst 方程 ，生长速 率除会受到酵母自身浓度的影响外，乙醇生成与细胞生长也密切相关。研究酵母细胞生长与乙醇生产 之间的关系，对于优化高浓度乙醇生产至关重要。 本文采用 CSTR [6]和添加秋水仙素抑制细胞生长的方式 [7]来研究细胞生长与乙醇生产之间的关联 机制。通过设定不同的菌体生长速度，研究细胞生长速率、菌体浓度、乙醇浓度、残糖浓度、细胞比 乙醇生成速率（μ）之间的关系，从而为高浓度乙醇的发酵生产提供理论指导。 1 材料与方法 1．1 材料 1．1．1 菌种 酿酒酵母 F4.7(福州大学药物技术研究所选育)。 1．1．2 培养基 种子培养基：葡萄糖 30g/l，酵母膏 8.5 g/l，NH Cl 1.3g/l，MgSO ·7H O 0.1g/l，CaCl 0.06g/l. 4 4 2 2 g/l，CaCl 2.8g/l ，NaCl 1g/l ，MgSO 0.65g/l，(NH ) SO 0.5g/l ，KH PO 0.5g/l ， 发酵培养基：葡萄糖 150 2 4 4 2 4 2 4 蛋白胨 5g/l. 1．2 培养方法 1．2．1 种子培养 o 8 接种斜面酵母至 200ml 种子培养基中，于 30 C，150rpm 摇床培养至菌体浓度 1.5×10 个细胞/ml 以上。 1．2．2 发酵培养 上述种子培养基经离心后，将酵母细胞全部种子接种入 200ml 发酵培养基，先通氧培养 6h ，再 厌氧发酵至放罐。培养温度 30oC，pH5.0。 1．2．3 操作方法 收稿日期： 修回日期： *通讯作者，电子邮箱：mengchun@ 1